The role of heat shock protein Apg-2 in hepatic lipogenesis and hepatocarcinogenesis by using liver organoids.

利用肝类器官研究热休克蛋白 Apg-2 在肝脂肪生成和肝癌发生中的作用。

• 批准号: 22K08038
• 负责人: 山口 寛二
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08038/
• 关键词: 分子シャペロン; オルガノイド; 脂肪肝炎; 肝がん

分子シャペロンは細胞内蛋白の恒常性維持を担い細胞保護的作用を持つ反面、変性細胞の生存や癌細胞の抗アポトーシス作用から病態進展に寄与することが報告されている。我々の検討では、HSP110ファミリーに属するApg-2のノックアウトマウスにおいて、肝発がんと肝脂肪化抑制が確認された。Apg-2はユビキチン・プロテアソームシステムと共役し、Liver Kinase B1(Lkb1)の分解を促進させ、AMP-activated protein kinase(Ampk)シグナルを抑制し、脂肪肝、肝がんを促進する。この結果は、長期的かつ一連の、脂肪肝から肝発がん過程において、Apg-2が治療候補分子となり得ることを示している。しかし、この詳細な作用機序の解明に必要なin vitroの系として、単離したマウス肝細胞や肝がん細胞株では、代謝能低下や嫌気性解糖系に依存する癌細胞特有の代謝環境から不十分であった。この問題点を克服するために、本研究では、より生体に近い代謝環境を持つ肝オルガノイドと分化後の肝細胞を用いたApg-2分子の機能解析を発案した。即ち、Apg-2のwild type, ノックアウトマウス、Apg-2のシャペロン活性を担うATP結合部位,K68をアラニン（A）に変異させたノックインマウスの3系統より肝オルガノイドを作成し、機能解析を行う（下図実験①）。さらに、肝オルガノイド移植実験を行う（下図実験②）。このApg-2のin vitroでの解析系は今後の創薬開発の前段階となる化合物や抗体スクリーン系として重要な過程である。

The role of molecular proteins in the maintenance of homeostasis in cytoprotection, survival and cancer cell resistance to disease progression is reported. HSP110 is a member of Apg-2 and is recognized as a member of the liver fatfication inhibition group. Apg-2 promotes the decomposition of Liver Kinase B1(Lkb1), inhibits AMP-activated protein kinase(Ampk), promotes fatty liver and liver cancer. As a result, long-term liver failure, fatty liver failure, and Apg-2 therapy candidate molecules were identified. To understand the detailed mechanism of action, it is necessary to study the metabolic environment specific to cancer cells, such as low metabolic energy, low metabolic capacity and low metabolic capacity. This study aims to elucidate the function of Apg-2 in differentiated hepatocytes in response to the metabolic environment in vivo. That is, Apg-2 wild type, Apg-2 wild type, Apg This time, the liver transplant will be carried out (below). The analysis of Apg-2 in vitro is an important process in the early stages of its development.