カルシウム感受性亢進に着目した冠攣縮性狭心症の新規病態の解明と治療法の確立

我々が臨床例に即した冠攣縮性狭心症動物モデルとして作成したヒトR257H亜型PLC-delta 1血管平滑筋過剰発現マウス（PLC-TGマウス）を用いて、β遮断薬であるカルベジロールならびにプロプラノロールを投与し、冠攣縮抑制効果を検討した。PLC-TGマウスにアゴニスト（エルゴノビン）を投与すると体表面心電図にてST上昇が観察された。カルベジロールの投与は心拍数や血圧に影響を与えることなく、冠攣縮を抑制した。一方、プロプラノロールの投与では、冠攣縮は抑制されなかった。さらに、細胞外からのカルシウムイオン流入調節に重要な役割を担っているAキナーゼアンカー蛋白（AKAP）79/150のノックアウト（AKAP-KO）マウスを用いて、同様の実験を行った。AKAP-KOマウスにアゴニスト（エルゴノビン）を投与すると体表面心電図にてST上昇が観察された。カルベジロール投与により、冠攣縮は抑制されたが、プロプラノロール投与では抑制されなかった。続いて、AKAP-KOマウスの大動脈より大動脈平滑筋細胞をExplant法にて分離培養した。得られた細胞をアセチルコリンで刺激したところ、カルシウムイオンの細胞内への流入はコントロール群とカルベジロール投与群で有意差を認めなかった。さらに、血管平滑筋の収縮に直接関与しているミオシン軽鎖のリン酸化は、カルベジロール投与により抑制されたが、プロプラノロール投与では抑制されなかった。現在、カルベジロールによるミオシン軽鎖リン酸化抑制のメカニズムを検討中である。冠攣縮性狭心症患者3名より得られた末梢血単核球細胞を用いて、iPS細胞を作成した。核型検査を行い、染色体異常のない細胞を血管平滑筋細胞に分化誘導した。現在、血管平滑筋細胞特異的マーカーを用いて、平滑筋への細胞分化を評価中である。

我々が臨床例に即した冠攣縮性狭心症動物モデルとして作成したヒトR257H亜型PLC-delta 1血管平滑筋過剰発現マウス（PLC-TGマウス）を用いて、β遮断薬であるカルベジロールならびにプロプラノロールを投与し、冠攣縮抑制効果を検討した。PLC-TGマウスにアゴニスト（エルゴノビン）を投与すると体表面心電図にてST上昇が観察された。カルベジロールの投与は心拍数や血圧に影響を与えることなく、冠攣縮を抑制した。一方、プロプラノロールの投与では、冠攣縮は抑制されなかった。さらに、細胞外からのカルシウムイオン流入調節に重要な役割を担っているAキナーゼアンカー蛋白（AKAP）79/150のノックアウト（AKAP-KO）マウスを用いて、同様の実験を行った。AKAP-KOマウスにアゴニスト（エルゴノビン）を投与すると体表面心電図にてST上昇が観察された。カルベジロール投与により、冠攣縮は抑制されたが、プロプラノロール投与では抑制されなかった。続いて、AKAP-KOマウスの大動脈より大動脈平滑筋細胞をExplant法にて分離培養した。得られた細胞をアセチルコリンで刺激したところ、カルシウムイオンの細胞内への流入はコントロール群とカルベジロール投与群で有意差を認めなかった。さらに、血管平滑筋の収縮に直接関与しているミオシン軽鎖のリン酸化は、カルベジロール投与により抑制されたが、プロプラノロール投与では抑制されなかった。現在、カルベジロールによるミオシン軽鎖リン酸化抑制のメカニズムを検討中である。冠攣縮性狭心症患者3名より得られた末梢血単核球細胞を用いて、iPS細胞を作成した。核型検査を行い、染色体異常のない細胞を血管平滑筋細胞に分化誘導した。現在、血管平滑筋細胞特異的マーカーを用いて、平滑筋への細胞分化を評価中である。