Mechanical stimulation exacerbates osteoarthritis (OA) by activating synovial fibroblasts.

2022年度は主に「滑膜線維芽細胞における機械刺激による細胞機能変化の解明」という研究目標の達成に向けて研究に取り組んだ。ヒト初代培養滑膜線維芽細胞（hSyno）において機械刺激受容チャネルPiezo1および浸透圧感受性チャネルTRPV4が機能的に発現していることを明らかにし、流圧刺激誘発細胞内Ca2+濃度上昇にPiezo1チャネルが寄与することを見出した。また、培養細胞伸展装置ShellPa Proを用いて機械刺激負荷を行い、培養上清中に分泌された炎症性サイトカインや神経液性因子の測定を行った。その結果、hSynoに機械刺激（伸展率20%）を短時間負荷することによりATP分泌が増加することを明らかにし、このATP分泌は機械刺激負の荷時間に依存することを見出した。また、専用チャンバーにて機械刺激を負荷した細胞からサンプルを回収し、これらのサンプル解析を定量的RT-PCR法およびWestern Blotting法により検討中である。ShellPa Pro専用チャンバーを用いた細胞免疫染色も実施し、ヒト滑膜肉腫細胞株SW982に長期間機械刺激を負荷することにより細胞形態変化が引き起こされることも明らかにした。今後は、この細胞形態変化の原因分子を探索する予定である。2023年度の研究目標である「伸展刺激活性化滑膜線維芽細胞が軟骨細胞リモデリングに及ぼす影響」については、今年度から準備を始めている。ゴンドラ型インサートに軟骨細胞（OUMS-27）を播種し、底面に播種したhSynoとの共培養系を構築し、底面のhSynoからのサンプル作成に成功した。しかし、このゴンドラ型インサートに播種したOUMS-27からのサンプル回収が難航している。今後、安定的にサンプルを回収できる系の確立を目指す予定である。

2022年度は主に「滑膜線維芽細胞における機械刺激による細胞機能変化の解明」という研究目標の達成に向けて研究に取り組んだ。ヒト初代培養滑膜線維芽細胞（hSyno）において機械刺激受容チャネルPiezo1および浸透圧感受性チャネルTRPV4が機能的に発現していることを明らかにし、流圧刺激誘発細胞内Ca2+濃度上昇にPiezo1チャネルが寄与することを見出した。また、培養細胞伸展装置ShellPa Proを用いて機械刺激負荷を行い、培養上清中に分泌された炎症性サイトカインや神経液性因子の測定を行った。その結果、hSynoに機械刺激（伸展率20%）を短時間負荷することによりATP分泌が増加することを明らかにし、このATP分泌は機械刺激負の荷時間に依存することを見出した。また、専用チャンバーにて機械刺激を負荷した細胞からサンプルを回収し、これらのサンプル解析を定量的RT-PCR法およびWestern Blotting法により検討中である。ShellPa Pro専用チャンバーを用いた細胞免疫染色も実施し、ヒト滑膜肉腫細胞株SW982に長期間機械刺激を負荷することにより細胞形態変化が引き起こされることも明らかにした。今後は、この細胞形態変化の原因分子を探索する予定である。2023年度の研究目標である「伸展刺激活性化滑膜線維芽細胞が軟骨細胞リモデリングに及ぼす影響」については、今年度から準備を始めている。ゴンドラ型インサートに軟骨細胞（OUMS-27）を播種し、底面に播種したhSynoとの共培養系を構築し、底面のhSynoからのサンプル作成に成功した。しかし、このゴンドラ型インサートに播種したOUMS-27からのサンプル回収が難航している。今後、安定的にサンプルを回収できる系の確立を目指す予定である。