HTLV-1水平感染者で誘導されるEnv特異的抗体の性状解析

成人T細胞白血病 (ATL) はヒトT細胞白血病ウイルス1型 (HTLV-1) の感染によって引き起こされるCD4陽性T細胞の腫瘍性疾患であり、極めて予後不良である。根治療法や発症予防法は確立されておらず、新しい治療戦略が望まれる。申請者らの疫学研究によって得られた「水平感染後に感染者に誘導されるHTLV-1 Env蛋白質gp46 197-216AAを認識する抗体（gp46-197抗体）が、生体内プロウイルス量の抑制活性を持つ」という知見に基づき、感染者由来のモノクローナル抗体の医薬品化を目指す。HTLV-1水平感染者の抗原特異的記憶B細胞を単離し、分化増殖させることにより目的とする抗体を産生する形質細胞をクローン化し、抗体タンパク質の大量産生と性状解析を実施する。本研究課題では将来の医薬品化を目指した抗体医薬のProof of Conceptを取得するところまでを達成目標とする。本精製モノクローナル抗体医薬が実用化すれば、関連疾患発症の抑制、母児感染対策等において有用性が期待できる。今回の検討では、gp46 197-216 AAペプチドを蛍光標識したペプチドプローブを作成した。同ペプチドプローブを用いてgp46 197-216 AAと特異的に反応するメモリーB細胞の検出方法を確立した。HTLV-1水平感染キャリアの末梢血PBMCよりgp46 197-216反応性メモリーB細胞を単離・培養し、抗体産生細胞クローンを２株得た。これらのクローンから産生されたgp46-197抗体のエピトープ は200-211 AA付近であると推定され、キャリア血漿中の抗体の主要エピトープ と一致していた。今後は取得した抗体の可変領域の配列決定、および細胞株での抗体産生を経て、抗体分子の大量取得を試みる。その後抗体の生理活性を解析する予定である。

成人T細胞白血病 (ATL) はヒトT細胞白血病ウイルス1型 (HTLV-1) の感染によって引き起こされるCD4陽性T細胞の腫瘍性疾患であり、極めて予後不良である。根治療法や発症予防法は確立されておらず、新しい治療戦略が望まれる。申請者らの疫学研究によって得られた「水平感染後に感染者に誘導されるHTLV-1 Env蛋白質gp46 197-216AAを認識する抗体（gp46-197抗体）が、生体内プロウイルス量の抑制活性を持つ」という知見に基づき、感染者由来のモノクローナル抗体の医薬品化を目指す。HTLV-1水平感染者の抗原特異的記憶B細胞を単離し、分化増殖させることにより目的とする抗体を産生する形質細胞をクローン化し、抗体タンパク質の大量産生と性状解析を実施する。本研究課題では将来の医薬品化を目指した抗体医薬のProof of Conceptを取得するところまでを達成目標とする。本精製モノクローナル抗体医薬が実用化すれば、関連疾患発症の抑制、母児感染対策等において有用性が期待できる。今回の検討では、gp46 197-216 AAペプチドを蛍光標識したペプチドプローブを作成した。同ペプチドプローブを用いてgp46 197-216 AAと特異的に反応するメモリーB細胞の検出方法を確立した。HTLV-1水平感染キャリアの末梢血PBMCよりgp46 197-216反応性メモリーB細胞を単離・培養し、抗体産生細胞クローンを２株得た。これらのクローンから産生されたgp46-197抗体のエピトープ は200-211 AA付近であると推定され、キャリア血漿中の抗体の主要エピトープ と一致していた。今後は取得した抗体の可変領域の配列決定、および細胞株での抗体産生を経て、抗体分子の大量取得を試みる。その後抗体の生理活性を解析する予定である。