Development of new preventive method for postoperative paraplegia of thoracoabdominal aorta using exosomes

利用外泌体开发胸腹主动脉术后截瘫的新预防方法

• 批准号: 22K08940
• 负责人: 清水 雄介
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: University of the Ryukyus
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08940/
• 关键词: 脂肪幹細胞; エクソソーム; 再生医療; 脊髄虚血; 対麻痺; 虚血性対麻痺; 脊髄軟膜下投与; 胸腹部大動脈術後

今年度は１）ラットからの「脂肪採取、脂肪幹細胞抽出、培養」　２）「脂肪幹細胞培養上清からのエクソソーム抽出」３）「ラット脊髄虚血後痙性麻痺モデルに対する同種エクソソーム注入」の３つを軸として研究を推進した。１）「脂肪幹細胞採取、脂肪幹細胞抽出、培養」に関しては野生型ラットから脂肪を採取した後、脂肪幹細胞の抽出を実施した。これまでにも当研究チームで実施した経験から、この抽出した脂肪幹細胞を培養し、安定的に増殖させる技術を問題なく確立できた。今後も脂肪幹細胞抽出、培養を継続し、技術を洗練させていく予定である。２）「脂肪幹細胞上清からのエクソソーム抽出」に関しては、以前より我々が行っているヒト脂肪幹細胞培養上清からのエクソソーム抽出方法に準じながら実施した。この点について、幹細胞培養上清からエクソソームを精製するための新しいキットを開発し特許を取得した。今後は同キットを用いて抽出したエクソソームの定量評価および定性的解析を実施する。３）「ラット脊髄虚血後痙性麻痺モデルに対するエクソソーム注入」に関しては、まず安定的なモデル動物（ラット大動脈遮断による痙性麻痺モデル）の確立を目指し実験を推進し、安定的なモデル動物の準備が可能となった。またラット脂肪幹細胞から精製したエクソソームを安全に脊髄に注入するための手技（＝脊髄軟膜下注入法）を繰り返し、注入手技に関して習熟し、問題なく施行することを確認した。今後は我々が新たに開発したエクソソーム精製キットを用いてラット脂肪幹細胞培養上清からエクソソームを精製し、準備した脊髄障害ラットの軟膜下注入を繰り返す予定である。またエクソソーム注入後にどのように効果が作用するかをラット行動実験で確認し、エクソソームの痙性対麻痺に対する運動機能回復効果を評価検討する。

Our は "1) ラ ッ ト か ら の" fat, fat stem cells out, cultivating "2)" adipose stem cell culture supernatant か ら の エ ク ソ ソ ー ム out "3)" ラ ッ ト spasm after spinal marrow virtual blood palsy モ デ ル に す seaborne る same エ ク ソ ソ ー ム injection "の 3 つ を shaft と し を て research advance し た. 1) "Adipose-derived stem cells collection, adipose-derived stem cells extraction, and culture" に related to て て wild-type ラット ら ら adipose-derived を collection た た, adipose-derived stem cells <s:1> extraction を administration of た. こ れ ま で に も when the チ ー ム で be applied し た 経 験 か ら, こ の spare し た adipose stem cells を し, stable に raised colonization さ せ る technology を な く establish で き た. In the future, the extraction and culture of adipose-derived stem cells will be を継続 を継続, and the techniques will be を refined, させて く く determined. 2) "fat stem cells on qing か ら の エ ク ソ ソ ー ム out" に masato し て は, before よ り I 々 が line っ て い る ヒ ト adipose stem cell culture supernatant か ら の エ ク ソ ソ ー ム extraction method に quasi じ な が ら be applied し た. こ の point に つ い て, stem cell culture supernatant か ら エ ク ソ ソ ー ム を refined す る た め の new し い キ ッ ト を open 発 し charter を obtain し た. In the future, キットを and キットを will use the て て to extract the <s:1> たエ ソソ ム ム ム ム quantitative evaluation 価および qualitative analysis を implementation する. 3) "ラ ッ ト spasm after spinal marrow virtual blood palsy モ デ ル に す seaborne る エ ク ソ ソ ー ム injection" に masato し て は, ま ず stable な モ デ ル animals (ラ ッ ト artery interrupt に よ る spasm, paralysis モ デ ル) の establish を refers し be 験 を し, stable な モ デ ル animals の prepare が may と な っ た. ま た ラ ッ ト adipose stem cells か ら refined し た エ ク ソ ソ ー ム を security に spinal marrow に injection す る た め の manipulation (= spinal marrow injection law under the soft membrane) を Qiao り return し, injection manipulation に masato し て acquisition し, problem な く imposed す る こ と を confirm し た. Future は I 々 が new た に open 発 し た エ ク ソ ソ ー ム refined キ ッ ト を with い て ラ ッ ト adipose stem cell culture supernatant か ら エ ク ソ ソ ー ム を refined し, preparing し た spinal marrow handicap of ラ ッ ト の soft membrane under injection を Qiao り return す designated で あ る. ま た エ ク ソ ソ ー ム injection after に ど の よ う に unseen fruit が role す る か を ラ ッ ト action be 験 で confirm し, エ ク ソ ソ ー ム の convulsion sex moral paralysis に す seaborne る motor function reply unseen fruit を review 価 beg す 検 る.

项目成果

脂質二重膜に覆われた微粒子又は細胞外小胞の回収方法および 脂質二重膜に覆われた微粒子又は細胞外小胞の回収キット

脂质双层膜覆盖的微粒或细胞外囊泡的采集方法以及脂质双层膜覆盖的微粒或细胞外囊泡的采集试剂盒

• 发表时间: 2022