非小細胞肺癌における腫瘍関連好中球浸潤の分子メカニズムとその臨床的意義の解明

非進行非小細胞肺癌の標準治療は外科的切除であるが、患者の多くが術後に再発をきたす。従って、術後再発のメカニズムを理解し、コントロールすることは非小細胞肺癌治療のために必要不可欠である。近年、腫瘍中の好中球 Tumor-associated neutrophil（TAN）が腫瘍の転移や再発に重要な役割を担っていることが明らかになりつつある。我々のグループは、肺癌マウスモデルの作成を通じてLy6ファミリーの一員であるLY6Dが腫瘍細胞に高発現していることを発見し、実際の患者組織検体においてもLY6Dが発現していることを報告してきた。さらに、公開トランスクリプトームデータベースの解析より、LY6D高発現群では好中球の活性化に関わる遺伝子が活性化していること、LY6D高発現腫瘍にはより多くのTANが浸潤している傾向を見出した。これらの知見から、LY6D発現は好中球の活性化や浸潤に関与し非小細胞肺癌の転移再発に寄与している可能性を考えた。本年度は腫瘍中の好中球浸潤を解析するために種々の免疫細胞、線維芽細胞、腫瘍マーカーを同一スライドで検出できるマルチプレックス免疫組織染色法の条件検討を行った。また、染色・撮像した画像を解析する解析パイプラインの構築を行った。さらに、免疫細胞浸潤におけるLy6dの機能を解析するために、Ly6dを発現する細胞がEGFPで蛍光標識され、Ly6dを任意のタイミングでノックアウトできるLy6dコンディショナルノックアウトマウスの作製に取り組んだ。

非進行非小細胞肺癌の標準治療は外科的切除であるが、患者の多くが術後に再発をきたす。従って、術後再発のメカニズムを理解し、コントロールすることは非小細胞肺癌治療のために必要不可欠である。近年、腫瘍中の好中球 Tumor-associated neutrophil（TAN）が腫瘍の転移や再発に重要な役割を担っていることが明らかになりつつある。我々のグループは、肺癌マウスモデルの作成を通じてLy6ファミリーの一員であるLY6Dが腫瘍細胞に高発現していることを発見し、実際の患者組織検体においてもLY6Dが発現していることを報告してきた。さらに、公開トランスクリプトームデータベースの解析より、LY6D高発現群では好中球の活性化に関わる遺伝子が活性化していること、LY6D高発現腫瘍にはより多くのTANが浸潤している傾向を見出した。これらの知見から、LY6D発現は好中球の活性化や浸潤に関与し非小細胞肺癌の転移再発に寄与している可能性を考えた。本年度は腫瘍中の好中球浸潤を解析するために種々の免疫細胞、線維芽細胞、腫瘍マーカーを同一スライドで検出できるマルチプレックス免疫組織染色法の条件検討を行った。また、染色・撮像した画像を解析する解析パイプラインの構築を行った。さらに、免疫細胞浸潤におけるLy6dの機能を解析するために、Ly6dを発現する細胞がEGFPで蛍光標識され、Ly6dを任意のタイミングでノックアウトできるLy6dコンディショナルノックアウトマウスの作製に取り組んだ。