塩基性ヘリックスループヘリックス転写機構制御と細胞治療を融合する神経再生治療開発

开发结合基本螺旋-环-螺旋转录机制控制和细胞治疗的神经再生疗法

• 批准号: 22K09280
• 负责人: 西村 由介
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09280/
• 关键词: ヒト由来歯髄幹細胞; Neurod4; MCP-1; TGF-β; 下肢運動機能; マクロファージ; 脊髄損傷; 神経再生; 歯髄幹細胞; バイオイメージング

①　bHLH神経転写因子の遺伝子導入、 in vitroでの神経栄養因子の測定：アフリカツメガエル幼生期に高発現している脊髄再生に関わるNeurod4（bHLH神経転写因子）をシュードウイルスベクターでSHED（ヒト由来歯髄幹細胞）に良好に遺伝子導入し(Neurod4-SHED)、ウエスタンブロットでNeurod4が発現されていることが確認できた。その後、in vitroで培養し、神経栄養因子の分泌（培養上清での測定）を測定し、Neurod4-SHEDをnaiveのSHEDと比較した結果、MCP-1、TGF-βが有意に上昇していることがつきとめられた。これらが炎症惹起するM1マクロファージより炎症抑制するM2マクロファージを活性化する機能を有するため、マクロファージの動態を解析することを現在行っている。②　ラットへのSHED投与、機能評価、組織学的解析：胸髄損傷ラットモデルを用い、SHEDを胸髄内に投与した。下肢運動機能スコア（BBBスコア）で良好な下肢の運動機能回復がnaiveのSHEDとの比較で有意差をもって確認された。③　Neurod4-SHEDの造腫瘍性試験：Neurod4-SHEDを移植して8週間の時点では、ラットの健康状態には問題がなく、造腫瘍性も否定されている。

(1) Gene introduction of bHLH neurotrophic factor and determination of neurotrophic factor in vitro: Neurod4 (bHLH neurotrophic factor) is involved in high development of spinal cord regeneration during infancy. After incubation, neurotrophic factor secretion (assay of culture supernatant) was determined, Neurod4-SHED was initially determined, MCP-1 and TGF-β were intentionally increased. M1, M2, M3, M4, M5, M6, M7, M8, M9, M10, M11, M12, M13, M14, M15, M16, M17, M18, M19, M19, M1 2. SHED injection, functional evaluation, histological analysis: chest injury, SHED injection in chest Lower limb motor function recovery is good, lower limb motor function recovery is good. (3) Neurod4-SHED tumorigenic test: Neurod4-SHED was transplanted at 8 weeks after transplantation.

项目成果

遺伝子導入歯髄幹細胞による新たな脊髄再生治療

使用基因转移牙髓干细胞的新型脊髓再生治疗

• 发表时间: 2022
• 作者: 加藤寛之;西村由介
• 通讯作者: 西村由介