Development of novel strategy for osteoporotic vertebral fracture using adipose-derived stem cell spheroids

利用脂肪干细胞球体开发治疗骨质疏松性椎体骨折的新策略

• 批准号: 22K09362
• 负责人: 高橋 真治
• 金额: $ 2.16万
• 依托单位: Osaka Metropolitan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09362/
• 关键词: 骨粗鬆症; 椎体骨折; スフェロイド; 脂肪肝細胞

本研究の目的は、ラットの卵巣摘出(OVX)モデルの椎体前方欠損に対してβ-TCPをscaffoldにしてADSCスフェロイドを移植して骨折の再生療法を確立することである。まずはin vivo, in vitroにおいて必要なADCS骨分化、ADSC骨分化後のスフェロイド化、ラットのOVXモデル、腰椎前方欠損モデルの手技を確立させた。その後、in vitroにおいて、骨分化スフェロイド、未分化スフェロイド、骨分化single cell、未分化single cellにおいてのapoptosis assayを評価した。スフェロイド化や骨分化を行った方がapoptosisを起こしにくい結果となった。また、遺伝子発現をRT-PCR法にて測定し、マイクロCT法で上記の４群を比較評価している。まだ単回の評価であるが組織修復を表すVEGFは未分化スフェロイドで大きく、骨形成を表すALPは骨分化スフェロイドで大きい傾向となっており、複数回の評価を行っていく予定である。In vivoにおいては、プレ実験を行っている。ラットOVXモデルに腰椎椎体前方欠損させたモデルに骨分化スフェロイドとβ-TCPを移植した骨分化スフェロイド群と、β-TCPのみを移植したコントロール群を、術後４週の段階で犠牲死させマイクロCTとMasson trichrome染色による組織評価を行っている。まだ数が少ない段階であるが、Controlと比較して骨分化スフェロイドで骨再生が高い事を示唆する結果となっている。in vivoの本実験においては骨分化スフェロイド群、未分化スフェロイド群、コントロール群の３群により、ADSCスフェロイドとβ-TCPの複合体がOVXラットの腰椎椎体前方欠損に移植し骨再生に有効であるか検証を行っていく予定としている。

The aim of this study was to establish a regenerative therapy for fractures by removing oocytes from the anterior vertebral body (OVX) and grafting ADSC into the β-TCP scaffold. In vivo, in vitro, it is necessary to establish the skills of ADCS bone differentiation, ADSC bone differentiation, OVX, and lumbar anterior damage. The aptosis assay was evaluated in vitro, bone differentiation, undifferentiation, bone differentiation single cell and undifferentiation single cell. The result of this process is that Detection of DNA by RT-PCR and comparative evaluation of the four groups listed above by CT The evaluation of single loop tissue repair indicates that VEGF is not differentiated, bone formation indicates ALP is differentiated, and the evaluation of multiple loop tissue repair is predetermined. In vivo OVX and β-TCP were used for bone differentiation and transplantation, and tissue evaluation was performed at 4 weeks after operation. The number of bone regeneration stages in the bone differentiation process is determined by the number of bone regeneration stages. In vivo, there are three groups of bone differentiation group, undifferentiation group and differentiation group, ADSC group and β-TCP complex.