mechanism of cancer cell proliferation in bone microenvironment of renal cell carcinoma

肾细胞癌骨微环境中癌细胞增殖机制

• 批准号: 22K09370
• 负责人: 高原 大一郎
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09370/
• 关键词: 骨微小環境; 腎がん細胞; microRNA

腎がんは溶骨型骨転移を起こし、多発骨転移や手術による骨転移巣切除が不能な場合は予後不良となる。腎がんの骨転移巣をターゲットとした分子標的薬の開発が望まれる。我々は予備実験で、同一患者で発生した原発巣と骨転移巣の腫瘍組織を次世代シークエンサーを用いて比較し、骨転移巣のみに高発現するCTNNB1の変異を同定した。本研究は腎がん細胞が骨微小環境での増殖能を獲得する分子メカニズムについて解明を目指すものである。骨微小環境で発現が上昇している遺伝子を検索・確認するために動物実験を行った。ヒト腎がん細胞株を6匹のヌードマウスの皮下と頭蓋骨直上に移植して皮下微小環境で腫瘍細胞が増殖する領域と骨微小環境で腫瘍細胞が増殖する領域を作成した。腫瘍は6匹中5匹で皮下に生着し、6匹全てで頭部に生着した。皮下微小環境と比較して骨微小環境では腫瘍サイズが大きい傾向にあった。それぞれの領域で新鮮凍結検体とホルマリン固定パラフィン包埋検体を作成した。ヘマトキシリンエオジン染色では頭部の腫瘍では頭蓋骨への骨浸潤、骨破壊が確認された。骨浸潤がみられる領域では、cathepsin-K陽性の破骨細胞が確認された。それぞれの領域で新鮮凍結検体から遺伝子を抽出し、次世代シークエンサーを用いて遺伝子の発現解析を行った。発現に差がある候補遺伝子をk-means法を用いて42個に絞り込んだ。今後は候補遺伝子の中からCTNNB1と関連のある遺伝子を選択し、その遺伝子の機能解析を行なっていく予定である。

The kidney has osteolytic bone migration, multiple bone migration and surgery, and bone migration cannot be excised. The development of molecular targets is expected to be successful. We prepare for this event, and the differences between the original development of the same patient and the tumor tissue of the bone metastasis are determined in the next generation. This study aims to explore the molecular mechanisms for the proliferation of kidney cells in bone microenvironments. The small environment of the bones is rising, and the animals are moving forward. 6 kidney cell lines were transplanted subcutaneously and vertically into the skull, and the proliferation of tumor cells in the subcutaneous microenvironment and the proliferation of tumor cells in the bone microenvironment was established. Five of the six were born under the skin and six were born on the head. Subcutaneous micro-environment is more likely to increase than bone micro-environment. All fields are fresh and frozen. All fields are fixed and embedded. The swelling of the head, bone infiltration and bone fracture were confirmed by staining. Bone infiltration was confirmed by osteoclasts positive for cathepsin-K. In the field of fresh frozen products, the generation of new products is extracted, and the generation of new products is analyzed. The k-means method is used in 42 cases. In the future, the candidate gene will be selected from CTNNB1 and related genes, and the function analysis of the candidate gene will be carried out in a predetermined manner.