滑膜常在マクロファージを中心とした関節炎症病態の解析

本年度はまず、変形性関節症から人工関節手術時に採取した滑膜マクロファージを、滑膜常在性マクロファージとして代用することの妥当性についての検討から行った。なお細胞採取と同時に組織標本も作成し、病理学的に明らかな炎症所見が見られない検体を選択し、解析に用いた。これらの検体から分離した滑膜マクロファージは既報の滑膜常在性マクロファージと同様の表現型を呈していることが確認された。そこで次に血液中の単球から誘導された炎症性M1型マクロファージ、非炎症性M2型マクロファージとの比較を行ったところ、滑膜常在性マクロファージはこれら両者の特徴が混在する、独特の表現系を呈することがわかった。サイトカイン遺伝子の発現パターンも同様であった。これらの基盤データを踏まえ、滑膜常在性マロファージを関節リウマチに関連する炎症刺激、すなわち免疫複合体を模した固相化IgG刺激、および既報の各種サイトカイン刺激による表現型、遺伝子発現の変化を、種々の実験条件で検討を行った。その結果、いずれの刺激条件においても滑膜常在性マクロファージは血液中単球由来のマクロファージに比べて反応性が乏しい傾向にあることが判明したが、これについては更なる検討が必要である。また、研究費の前倒し支払い請求を行い、マイクロアレイ法による滑膜常在性マクロファージも網羅的遺伝子発現変化解析の予備研究も行ったが、これからもおおむね同様の結果が得られている。

本年度はまず、変形性関節症から人工関節手術時に採取した滑膜マクロファージを、滑膜常在性マクロファージとして代用することの妥当性についての検討から行った。なお細胞採取と同時に組織標本も作成し、病理学的に明らかな炎症所見が見られない検体を選択し、解析に用いた。これらの検体から分離した滑膜マクロファージは既報の滑膜常在性マクロファージと同様の表現型を呈していることが確認された。そこで次に血液中の単球から誘導された炎症性M1型マクロファージ、非炎症性M2型マクロファージとの比較を行ったところ、滑膜常在性マクロファージはこれら両者の特徴が混在する、独特の表現系を呈することがわかった。サイトカイン遺伝子の発現パターンも同様であった。これらの基盤データを踏まえ、滑膜常在性マロファージを関節リウマチに関連する炎症刺激、すなわち免疫複合体を模した固相化IgG刺激、および既報の各種サイトカイン刺激による表現型、遺伝子発現の変化を、種々の実験条件で検討を行った。その結果、いずれの刺激条件においても滑膜常在性マクロファージは血液中単球由来のマクロファージに比べて反応性が乏しい傾向にあることが判明したが、これについては更なる検討が必要である。また、研究費の前倒し支払い請求を行い、マイクロアレイ法による滑膜常在性マクロファージも網羅的遺伝子発現変化解析の予備研究も行ったが、これからもおおむね同様の結果が得られている。