膀胱癌の再発診断における血漿および尿沈渣中変異DNAモニタリング

监测血浆和尿沉渣中的突变 DNA 以诊断膀胱癌复发

• 批准号: 22K09457
• 负责人: 露久保 敬嗣
• 金额: $ 2.41万
• 依托单位: Iwate Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09457/
• 关键词: 尿中DNA; 膀胱癌; 早期再発診断; バイオマーカー

膀胱癌の再発診断に有用な血液や尿中マーカーに乏しい。本研究では、血液や尿沈渣DNA中に含まれるがん細胞由来の遺伝子変異検出における"再発診断バイオマーカー"としての臨床的妥当性を検証した。未治療あるいは手術後2年以内の非転移性膀胱癌症例32例を登録した。次世代シークエンサーを用いて症例毎の遺伝子変異を検出した。治療前後や術後定期検査時の計230ポイントで採血・採尿を行い、血漿および尿沈渣DNA中の変異アリル頻度（Variant allele frequency, VAF）をDigital PCR(dPCR)により測定し、その動態をモニタリングした。観察期間の中央値は516日（30-733日）であった。腫瘍組織の遺伝子変異解析により32例中30例（93.8％）でモニタリング可能な体細胞変異を検出した。1例あたりのモニタリングする体細胞変異数は平均2.3個（1-4）であった。尿沈渣DNAの平均VAFは、再発例で16.7%（0-72.3％， n = 51）、無再発例で0.035%（0-0.87％， n = 196， p < 0.001）であった。尿路再発を生じた7例中5例では臨床的再発診断に先行して尿沈渣DNAのVAFが1%以上に上昇し、その先行期間の中央値は210日（0-441日）であった。尿路再発を生じなかった残り23例はいずれも尿沈渣DNAのVAFは1%以下で経過した。尿沈渣DNA中のVAFモニタリングを施行した30例中25例（83.3%）で、早期再発予測、治療効果判定、無再発確証のうち1つ以上の臨床的妥当性を示した。膀胱癌は再発率が高い一方、各ガイドラインでも術後フォローアップの適応に関するエビデンスレベルが低いのが現状である。今後、本手法を実臨床に応用できれば、再発リスクを定量的に評価した上で、追加治療適応症例の選定や、過剰な膀胱鏡検査の省略につながる可能性がある。

Bladder cancer recurrence diagnosis is useful in blood and urine. This study demonstrated the clinical validity of DNA in blood and urine sediments for the detection of genetic variation in cell origin. There were 32 cases of non-metastatic bladder cancer within 2 years after operation. The next generation is different. Before and after treatment, and at regular intervals after surgery, the frequency of Variant Allele (VAF) in blood and urine samples, plasma and urine sediment DNA was measured by Digital PCR(dPCR). 516 days (30-733 days) of the central period of observation. 30 out of 32 (93.8%) cases were found to have tumor tissue genetic variation. The average number of somatic cells in 1 case was 2.3 (1-4). The average VAF of urine sediment DNA was 16.7%(0-72.3%, n = 51) and 0.035%(0-0.87%, n = 196, p < 0.001). In 5 of 7 cases of urinary tract recurrence, VAF of urinary sediment DNA increased by more than 1% and the central value of the preceding period was 210 days (0-441 days). Urinary tract recurrence occurred in 23 cases, and urinary sediment DNA VAF was less than 1%. 25 cases (83.3%) of 30 cases of VAF in urine sediment DNA were performed, and the clinical appropriateness of early recurrence prediction, treatment effect determination and no recurrence confirmation was demonstrated. Bladder cancer recurrence rate is high, and all types of bladder cancer recurrence rates are low. In the future, the clinical application of this technique will be reviewed, and quantitative evaluation will be carried out again. It is possible to select additional suitable cases for treatment and omit cystoscopy examination.

项目成果

Clinical validity of plasma and urinary pellet DNA monitoring for the diagnosis of recurrent bladder cancer

血浆和尿颗粒 DNA 监测诊断复发性膀胱癌的临床有效性

• 发表时间: 2022
• 作者: Masakazu Abe;Hayato Hiraki;Daichi Tamura;Renpei Kato;Yoichiro Kato;Shigekatsu Maekawa;Mitsugu Kanehira;Ryo Takata;Wataru Obara;Satoshi Nishizuka
• 通讯作者: Satoshi Nishizuka

The clinical validity of urinary pellet DNA monitoring of recurrent bladder cancer

尿沉淀DNA监测对复发性膀胱癌的临床有效性

• 发表时间: 2023
• 作者: 内山勝文;福島健介;小山智久;大橋慶久;森谷光俊;高平尚伸;髙相晶士;内山勝文;内山勝文;阿部 正和
• 通讯作者: 阿部 正和

膀胱癌に関連した変異ＤＮＡの分析方法、並びにそのためのデジタルＰＣＲ用プライマー及びプローブ

分析与膀胱癌相关的突变DNA的方法及其数字PCR引物和探针

• 发表时间: 2022