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新規着床阻害タンパク質の機能解析を通した着床成立の分子基盤の解明

通过新型植入抑制蛋白的功能分析阐明植入的分子基础

基本信息

批准号：
22K09579
负责人：
青葉香代
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Saitama Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09579/
关键词：
着床

项目摘要

着床の成立には、胚と子宮内膜間において様々な分子の発現量が変動し、複雑で巧妙な相互作用が重要であることが示唆されているものの、未だ不明な点が多い。そこで、本研究では、広く脊椎動物に存在し受精調節作用を持つダイカルシンの着床調節作用の分子メカニズムを多面的・包括的に解析し、そのことを通し、着床率を調節する革新的なリード化合物を創出することを目的とし、2022年度において下記の成果を得た。１.ダイカルシン-ダイカルシン標的物質下流において接着能を調節する物質を同定するために、ダイカルシン標的物質存在下および非存在下のBeWo細胞（ヒト胚モデル細胞）においてRNA-Seqを行い、遺伝子の発現量を網羅的に比較解析した。その結果、複数の候補遺伝子を同定した。これら候補遺伝子の転写量の変化をリアルタイムPCRで解析する予定である。２. ダイカルシンによるインテグリン以外の接着因子発現への影響を解析するために、ダイカルシン存在下および非存在下のBeWo細胞（ヒト胚モデル細胞）を用い、着床を調節するシグナルとして知られるセレクチン、セレクチンリガンドについてウェスタンブロットによる解析を行なっている。着床を調節する他シグナルについても解析を進める。３.ダイカルシン-ダイカルシン標的物質作用軸によるin vivo着床率への影響を見るために非侵襲的にダイカルシン標的物質を投与する方法を確立した。性成熟したマウスを交配し、ダイカルシン標的物質を投与し、数日飼育後、着床部位の数を比較解析する実験を継続中である。

The amount of molecular production in the embryo and endometrium varies, and complex interactions are important. This study is aimed at creating innovative compounds for the regulation of fertilization and implantation in vertebrates, and the results are reported in 2022. 1. Comparative analysis of RNA-Seq activity and protein production in BeWo cells in the presence and absence of the target substance, which can regulate the activity of the target substance. The result of the test, the number of candidates and the number of candidates are determined simultaneously. The amount of candidate DNA can be changed to a predetermined amount by PCR analysis. 2. The analysis of the effects of adhesion factors other than those in the presence or absence of the receptor on the expression of BeWo cells (embryonic cells), the regulation of implantation, and the analysis of the effects of receptor factors on the expression of BeWo cells. He is the only one who has ever been involved in a crime. 3. To establish the method for determining the effect of the target substance on the implantation rate in vivo. Sexual maturity, mating, and implantation of the target substance after a few days of breeding, comparative analysis of the number of implantation sites