Comprehensive Search for Early Diagnostic Markers and Therapeutic Targets for Cervical Cancer Using Circular RNA in Blood

早期頸癌に特異的に発現する環状RNA候補の探索を行った。研究計画に基づき、早期頸癌患者、CIN患者、また検診を受けた健常婦人を対象として、健常者、CINまた早期頸癌患者の血液検体から、高品質のRNAを抽出した。そして、RNase R処理により線状RNAを分解することで、環状RNAを回収した。環状RNAを使い、環状RNAに特化したmicroarray解析を実施したことで、健常者に比較して、CINまた早期頸癌患者で特異的に高発現、また低発現する新規環状RNA候補群を同定した。上位新規環状RNA候補(hsa-circ_0003572、hsa-circ_00018289など)の発現は、健常者に比較して、CINまた早期頸癌患者で特異的に過剰発現することを解明した。CircFunBaseなどのdatabaseを活用して、正常組織に比べ、頸癌組織でhsa-circ_0003572及びhsa-circ_00018289などの環状RNAの発現の有意な上昇が確認された。更にqPCR解析により、環状RNAの発現を分析した上で、頸癌の早期診断を可能とする新しい診断マーカーとしてのhsa-circ_0003572及びhsa-circ_00018289有用性を確認した。続いて、正常細胞株と頸癌細胞株(Hela、SiHa及びCaSki)からtotal RNAを採集し、qPCR解析を行い、hsa-circ_0003572及びhsa-circ_00018289などの環状RNAの発現を解析した結果、正常細胞株に比較して、頸癌細胞株(Hela、SiHa及びCaSki)におけるhsa-circ_0003572及びhsa-circ_00018289の発現は、有意に上昇したことを突き止めた。特に悪性度の低い頸癌細胞株CaSki に比べ、悪性度の高い頸癌細胞株Hela及びSiHaでは、hsa-circ_0003572及びhsa-circ_00018289の発現は、著しく増加したことを発見した。以上の研究によって、頸癌の早期診断につながる新規環状RNAが存在することが示唆された。

早期頸癌に特異的に発現する環状RNA候補の探索を行った。研究計画に基づき、早期頸癌患者、CIN患者、また検診を受けた健常婦人を対象として、健常者、CINまた早期頸癌患者の血液検体から、高品質のRNAを抽出した。そして、RNase R処理により線状RNAを分解することで、環状RNAを回収した。環状RNAを使い、環状RNAに特化したmicroarray解析を実施したことで、健常者に比較して、CINまた早期頸癌患者で特異的に高発現、また低発現する新規環状RNA候補群を同定した。上位新規環状RNA候補(hsa-circ_0003572、hsa-circ_00018289など)の発現は、健常者に比較して、CINまた早期頸癌患者で特異的に過剰発現することを解明した。CircFunBaseなどのdatabaseを活用して、正常組織に比べ、頸癌組織でhsa-circ_0003572及びhsa-circ_00018289などの環状RNAの発現の有意な上昇が確認された。更にqPCR解析により、環状RNAの発現を分析した上で、頸癌の早期診断を可能とする新しい診断マーカーとしてのhsa-circ_0003572及びhsa-circ_00018289有用性を確認した。続いて、正常細胞株と頸癌細胞株(Hela、SiHa及びCaSki)からtotal RNAを採集し、qPCR解析を行い、hsa-circ_0003572及びhsa-circ_00018289などの環状RNAの発現を解析した結果、正常細胞株に比較して、頸癌細胞株(Hela、SiHa及びCaSki)におけるhsa-circ_0003572及びhsa-circ_00018289の発現は、有意に上昇したことを突き止めた。特に悪性度の低い頸癌細胞株CaSki に比べ、悪性度の高い頸癌細胞株Hela及びSiHaでは、hsa-circ_0003572及びhsa-circ_00018289の発現は、著しく増加したことを発見した。以上の研究によって、頸癌の早期診断につながる新規環状RNAが存在することが示唆された。