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ヒトiPS細胞由来気道上皮細胞移植における生着効率向上因子の探索

寻找提高人 iPS 细胞来源的气道上皮细胞移植植入效率的因素

基本信息

批准号：
22K09666
负责人：
桑田文彦
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

気管は呼気の通り道として重要であり、その管腔面を覆う気道上皮は呼気中の異物を排出する機能を担っているため、障害されると易感染性となり、時として生命にかかわる。申請者らはヒトiPS細胞由来気道上皮細胞移植治療による気管欠損部の早期上皮化を目指し、免疫不全ラットへの移植モデルを確立しているが、生着効率は低く実験ごとのばらつきも大きいため、改善が必要である。本研究では、我々が既に確立しているhiPSC由来気道上皮移植免疫不全ラットにつき一般的な移植条件を再検討することでI.移植効率の高い移植条件を検討し、その移植条件を用いて作製した移植モデルのII.移植部組織を採取し、遺伝子発現解析により、移植細胞生着に関与するホストとレシピエント双方の遺伝子群の選定をおこない、III.解析結果から想定される移植効率向上因子の調節による生着効率向上法の確立を目指す。今年度はヒト由来転写産物が検出されるよう、移植細胞の分化ステージの検討やヒトiPS細胞由来気道上皮細胞シートで被覆した人工気管の移植における術式など移植法の改善を行った上で、移植部位からのRNA抽出を複数回行い、解析に必要な量と品質が保たれるような移植部位のサイズ、組織保管法、回収法などの検討を行った。確定した条件で採取された組織からRNA抽出後、RNAの品質評価を行い、トランスクリプトーム解析を行った。またコントロールとして細胞なしの移植部組織、ヒト由来の移植細胞からもRNA抽出を行い、トランスクリプトーム解析に必要な量の検討を行った。

気管は呼気の通り道として重要であり、その管腔面を覆う気道上皮は呼気中の異物を排出する機能を担っているため、障害されると易感染性となり、時として生命にかかわる。糖尿病患者的iPS细胞由于道上皮细胞移植转移的幽门螺杆菌管壁部早期上皮化目指征，免疫不全的结核杆菌移植转移的不稳定性立显正常，出生率极低，负担沉重，病情严重，改善必要。本研究探讨，我墙板无菌支架植入hiPSC因移植道上皮下免疫不全的幽门螺杆菌感染一般的移植条件再感染的原因，I.移植率高的移植条件再感染，II.移植移植条件采用支架植入作幽门螺杆菌移植的方法，II.移植部位的幽门螺杆菌感染的取出，骨髓子细胞的取出分析，移植细胞的生长情况与幽门螺杆菌感染的发生有关，III.解析水果种植者认为确定种植转移率的因素是由种植转移率决定的。今年度的移植手术由于来写胶质瘤而退出临床，移植细胞分化不良，移植iPS细胞由于来移植道上皮细胞瘤形成不良反应，人工幽门螺杆菌管壁移植瘤形成的非典型增生型胶质瘤移植法改善行上消化道，移植部位微RNA提取数量回行扫描，解除分析所需的定量胶质瘤，保证移植部位的安全，保证管壁法，回行扫描。确定扩增条件后，将提取的RNA提取出来，RNA扩增后进行测序，并将扩增的RNA片段进行解译分析。非典型肺炎患者需要正常细胞悬液移植部移植，并且由于移植细胞悬液中RNA的提取而进行，因此非典型肺炎患者需要大量的非典型肺炎进行分析。