頭頸部癌患者から作成したスフェロイドを用いたがん微小環境によるEMT誘導の解析

本研究は頭頸部扁平上皮癌患者検体の腫瘍組織からスフェロイドを作成し（Cancer Tissue-Originated Spheroids Method;CTOS 法）、我々が開発した浸潤・転移モデル実験系( Chick Chorioallantoic Membrane; CAM invasion assay )を用いて単一癌細胞ではなく癌細胞塊におけるがん微小環境とEMT(Epithelial-Mesenchymal Transition、上皮間葉移行）誘導の関係を解明し頭頸がん治療向上につなげることを目的としている。がん微小環境において、がん細胞はEMT(Epithelial-Mesenchymal Transition、上皮間葉移行）を誘導され、浸潤・転移能、がん幹細胞化、免疫逃避能を獲得している。しかし、従来の単一細胞株実験系ではがん微小環境とEMTの関連を評価・解明することは困難である。そこで、患者検体からCTOS法でスフェロイドを作成し、分子生物学的にEMT進行度を検討しCAM assayにより判明する浸潤転移能との関連を評価する。スフェロイドを単一細胞化したものを同様にEMT進行度と浸潤転移能を評価し、がん細胞塊によけるがん微小環境とEMT誘導の関連を明らかにする。頭頸部扁平上皮癌の検体採取は行えている。スフェロイド作成を行うと同時に、頭頸部扁平上皮癌細胞株を用いて、snailの導入やPD-L1/PD-L2をノックダウンすることでEMTにどのように影響することをか確認している。作成したスフェロイドにおいてsnailやPD-Lの発現を見ることでスフェロイド内のEMTの進行度が均一であるかどうか確認できる準備を行なっている。

本研究は頭頸部扁平上皮癌患者検体の腫瘍組織からスフェロイドを作成し（Cancer Tissue-Originated Spheroids Method;CTOS 法）、我々が開発した浸潤・転移モデル実験系( Chick Chorioallantoic Membrane; CAM invasion assay )を用いて単一癌細胞ではなく癌細胞塊におけるがん微小環境とEMT(Epithelial-Mesenchymal Transition、上皮間葉移行）誘導の関係を解明し頭頸がん治療向上につなげることを目的としている。がん微小環境において、がん細胞はEMT(Epithelial-Mesenchymal Transition、上皮間葉移行）を誘導され、浸潤・転移能、がん幹細胞化、免疫逃避能を獲得している。しかし、従来の単一細胞株実験系ではがん微小環境とEMTの関連を評価・解明することは困難である。そこで、患者検体からCTOS法でスフェロイドを作成し、分子生物学的にEMT進行度を検討しCAM assayにより判明する浸潤転移能との関連を評価する。スフェロイドを単一細胞化したものを同様にEMT進行度と浸潤転移能を評価し、がん細胞塊によけるがん微小環境とEMT誘導の関連を明らかにする。頭頸部扁平上皮癌の検体採取は行えている。スフェロイド作成を行うと同時に、頭頸部扁平上皮癌細胞株を用いて、snailの導入やPD-L1/PD-L2をノックダウンすることでEMTにどのように影響することをか確認している。作成したスフェロイドにおいてsnailやPD-Lの発現を見ることでスフェロイド内のEMTの進行度が均一であるかどうか確認できる準備を行なっている。