頭頸部癌患者から作成したスフェロイドを用いたがん微小環境によるEMT誘導の解析

使用头颈癌患者产生的球体分析癌症微环境诱导的 EMT

• 批准号: 22K09747
• 负责人: 木村 隆浩
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Nara Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09747/
• 关键词: 頭頸部癌; 癌微小環境; スフェロイド; EMT; 免疫チェックポイント阻害薬; がん微小環境

本研究は頭頸部扁平上皮癌患者検体の腫瘍組織からスフェロイドを作成し（Cancer Tissue-Originated Spheroids Method;CTOS 法）、我々が開発した浸潤・転移モデル実験系( Chick Chorioallantoic Membrane; CAM invasion assay )を用いて単一癌細胞ではなく癌細胞塊におけるがん微小環境とEMT(Epithelial-Mesenchymal Transition、上皮間葉移行）誘導の関係を解明し頭頸がん治療向上につなげることを目的としている。がん微小環境において、がん細胞はEMT(Epithelial-Mesenchymal Transition、上皮間葉移行）を誘導され、浸潤・転移能、がん幹細胞化、免疫逃避能を獲得している。しかし、従来の単一細胞株実験系ではがん微小環境とEMTの関連を評価・解明することは困難である。そこで、患者検体からCTOS法でスフェロイドを作成し、分子生物学的にEMT進行度を検討しCAM assayにより判明する浸潤転移能との関連を評価する。スフェロイドを単一細胞化したものを同様にEMT進行度と浸潤転移能を評価し、がん細胞塊によけるがん微小環境とEMT誘導の関連を明らかにする。頭頸部扁平上皮癌の検体採取は行えている。スフェロイド作成を行うと同時に、頭頸部扁平上皮癌細胞株を用いて、snailの導入やPD-L1/PD-L2をノックダウンすることでEMTにどのように影響することをか確認している。作成したスフェロイドにおいてsnailやPD-Lの発現を見ることでスフェロイド内のEMTの進行度が均一であるかどうか確認できる準備を行なっている。

This study was conducted to determine the tumor tissue profile of patients with squamous cell carcinoma of the head and neck (Cancer Tissue-Originated Spheroids Method;CTOS Method)( Chick Chorioallantoic Membrane; CAM invasion assay is used to explain the relationship between microenvironment and EMT(Epithelial-Mesenchymal Transition) induction in a single cancer cell mass. Micro-environment, micro-cells and EMT(Epithelial-Mesenchymal Transition) induction, infiltration, migration, stem cell transformation, immune escape ability acquisition. The relationship between microenvironment and EMT is evaluated and explained in detail. This paper reviews the relationship between the CTOS assay and the molecular biology of EMT and CAM assay. The relationship between EMT induction and microenvironment is discussed. Head and neck squamous cell carcinoma The expression of PD-L1/PD-L2 in squamous cell carcinoma of the head and neck was confirmed by the expression of PD-L1/PD-L2 in squamous cell carcinoma of the head and neck. When the discovery of snail and PD-L is seen in the production of the SFS logo, the progress of EMT in the SFS logo becomes uniform and confirmed, and preparations are made.