Basic science research for establishment of high-dose IgG therapy for post-traumatic olfactory dysfunction

建立高剂量IgG治疗创伤后嗅觉功能障碍的基础科学研究

• 批准号: 22K09742
• 负责人: 石神 瑛亮
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09742/
• 关键词: 嗅覚; 再生医療

本年度は嗅神経切断時に高用量IgGが嗅神経再生に対して及ぼす効果を組織学的に検討した。まず、組織学的に嗅神経を容易に視覚的に確認可能なOMP-tau-lacZ マウスを全身麻酔下で前頭開頭し、ステンレスカッターで一側の嗅神経を切断した。なお、対側はコントロールとして神経切断を行わずとした。閉頭後、動物を覚醒させ、手術直後にIgGまたは生理食塩水を腹腔内注射し、低用量、高用量の2種類のIgG投与群とコントロールとしての生理食塩水投与群の計３群を設けた。術後5日目、14日目、42日目、70日目に、それぞれマウスを固定、脱灰し、組織切片を染色してCCD カメラでデジタル画像化し、嗅神経の再生、グリア瘢痕形成、炎症マーカーとしてマクロファージの局所浸潤を定量測定した。なお、嗅神経はX-Gal 染色で嗅神経と嗅球の糸球体を可視化した。グリア瘢痕はニュートラルレッド染色で確認した。活性化星状膠細胞は抗GFAP 抗体の、マクロファージは抗CD68 抗体の免疫染色で確認した。この結果、抗HMGB1 抗体投与群では用量依存性にグリア瘢痕増生とマクロファージ局所浸潤の抑制が有意に生じ、嗅神経の嗅球再支配が有意に促進した。以上から、高用量IgGが嗅神経切断後の嗅神経再生を促進させることが明らかになった。

This year, high doses of IgG were used for olfactory regeneration and histological studies. Histological examination of the olfactory nerve is easy to confirm. OMP-tau-lacZ can be used to cut off the olfactory nerve at the beginning of the whole body anesthesia. The two sides of the road are on the right side of the road After head closure, animal recovery, and surgery, two types of IgG were administered intraperitoneally, at low and high doses, and three groups of IgG were administered intraperitoneally. 5, 14, 42, 70 days after surgery, the tissue was fixed, deashed, stained, imaged by CCD, regenerated olfactory nerve, scar formation, inflammation, and infiltration of the tissue were quantitatively measured. X-Gal staining of the olfactory nerve and olfactory bulb visualizes the olfactory bulb. Scar staining was used to confirm the scar. Activated astrocytes were confirmed by immunostaining for anti-GFAP antibodies and anti-CD68 antibodies. The results showed that the anti-HMGB1 antibody dose dependently inhibited scar formation and olfactory bulb redistribution. High doses of IgG promote olfactory nerve regeneration after olfactory nerve disconnection.