ゼノファジー誘導細胞シートを用いたインプラント周囲組織の再生

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インプラントの歯肉溝上皮細胞は機能的バリアと防御システムが天然歯の歯周組織と異なるため感染の防御が弱いことが考えられる。インプラント歯肉溝上皮に細菌に対して選択的に誘導されるゼノファジーを利用した歯肉溝細胞を誘導し、インプラント周囲組織に不足している強固なバリアを獲得することを目的とし以下の実験を計画した。１．LPS刺激上皮細胞におけるゼノファジーの誘導：LPSによるゼノファジーを誘導するため細胞刺激方法の検討を行った。歯周病細菌Porphyromonas　gingivalis由来LPSを使用し、ゼノファジーを誘導を行うこととした。ゼノファジー誘導可能な適正なLPS濃度、刺激時間・タイミング等の検討を行った。２．上皮細胞シートを作製：細胞シート作製方法として温度応答性培養法を利用した。口腔組織由来の上皮細胞を温度応答性培養ディッシュで培養し、細胞シート作製に適切な細胞数や播種密度、培養条件の検証、培養ディッシュのコーティング方法、培養期間、回収のタイミング等の検証を行った。また細胞シート回収後の組織学的解析を行うため組織標本による評価を検討した。３．LPS刺激ゼノファジー誘導細胞シートの作製：上記で作製した細胞シートの形態を維持し、且つゼノファジーを誘導可能な細胞シートを作製するためにLPSの刺激調整を検討する必要があった。LPS濃度・刺激方法の検討を行い細胞シートの作製を検討した。