老人性難聴とエピジェネティックス－DNAメチル化とヒストン蛋白質修飾の解析

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1.ヒストン蛋白質修飾の検討若年群と加齢群のマウスより側頭骨を摘出し、ホモジェナイズ後、ヒストン蛋白質定量キットを用い、若年群と加齢群のヒストン蛋白質修飾の変化を検討中であるが、現時点で有意差は明らかではなかった。パラフィン包埋した側頭骨から切片を作成し、抗ヒストン蛋白質抗体を用い、蛍光染色を行った。その結果、剥年郡ではH3k9およびH4k8のアセチル化およびH3k27のメチル化、加齢群ではH3k9のメチル化を認めた。これらの結果を踏まえ、ヒストン蛋白質修飾定量法を検討中である。2.DNAメチル化の検討側頭骨よりDNAを抽出した。DNA量は加齢群で若年群に比べ、約50％に減少した。その後、バイサルファイト処理を行った。バイサルファイト未処理なDNAと処理済みのDNAに対応したプライマーを作成した。qPCRを行い、検討中である。