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生活習慣の予防を目的とした効率的な食品由来AGEs生成阻害化合物の探索

寻找有效的食品源性 AGEs 产生抑制化合物以预防生活方式

基本信息

批准号：
25750056
负责人：
白河潤一
金额：
$ 2.41万
依托单位：
Tokai University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25750056/
关键词：
AGEs生成抑制植物成分抽出 ELISA法

项目摘要

本研究の目的であるAGEs生成阻害剤の探索として、前年度に続き、植物抽出物のEnzyme-Linked ImmunoSorbent Assay（ELISA）法によるAGEs生成抑制効果の検証を行った。前年度AGEs生成抑制効果が認められたモウセンゴケ属（Drosera）と近縁の分類群であるルリマツリ（Pulumbago auriculata）および、日常的に食されている野菜や民間療法的に利用されてきた野草等、計11種の植物についてエタノール、アセトンおよび熱湯抽出を行い、それぞれの抽出物を得た。これらの抽出物のAGEs生成抑制効果を、Nω-carboxy(methyl)arginine（CMA）およびNε-(carboxymethyl)lysine（CML）に対する特異的モノクローナル抗体を用いたELISA法によって検証した。その結果、BSAとリボース混合液を1週間37℃でインキュベートし、糖化反応を進行させた条件下において、それぞれの抽出物を0.01 mg/ml の濃度で添加すると、ゲンノショウコ（Geranium thunbergii）の抽出物添加群でCMAおよびCML生成量が無添加群に比べ有意に低下した。本結果から、これらの植物抽出物がCMAおよびCMLの生成を抑制することが明らかとなり、AGEs生成阻害剤として利用できる可能性が示された。また、生体中におけるAGEs検出のための液体クロマトグラフィー・タンデム質量分析（LC-MS/MS）および高速液体クロマトグラフィー（HPLC）による測定系の確立を行い、血清中において6種のAGEsの定量が可能となった。

The purpose of this study is to explore the inhibitors of AGEs production and to identify the inhibitory effects of AGEs production by Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (ELISA) in plant extracts. In the past year, AGEs production inhibition effect was recognized, including Drosera, Pulumbago auriculata, daily food, wild vegetables, folk remedies, weeds, etc., 11 species of plants, including hot soup extraction, and extracts. The inhibitory effect of AGEs production of these extracts was detected by ELISA for Nω-carboxy(methyl)arginine (CMA) and Nε-(carboxymethyl)lysine (CML). As a result, BSA and CML were added at a concentration of 0.01 mg/ml to the mixture at 37℃ for one week, and the amount of CML produced was intentionally lower than that of CMA without addition. The results showed that the plant extracts could inhibit CMA and CML production, and the possibility of inhibiting AGEs production and utilization was also discussed. The determination of AGEs in vivo and in serum by LC-MS/MS and HPLC is possible.