PKC活性化剤グニディマクリンの制癌活性とその作用機序に関する研究

PKC激活剂格尼地马克林的抗癌活性及作用机制研究

• 批准号: 08877335
• 负责人: 吉田 光二
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: National Cancer Center Research Institute and Research Center for Innovative Oncology, National Cancer Center Hospital East
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877335/
• 关键词: グニディマクリン; PKC; PKCbetaII; cdk2; G_1停止; 狼毒; 細胞周期制御; p21(WAF1; CIP1); PKCβII; ダウンレギュレーション; フォルボールエステル; PDBu; G1停止

我々が瑞香狼毒という中国産の植物から単離したグニディマクリンはマウス白血病や固形癌に強い制癌効果を示し、ヒト癌細胞の増殖をピコモルの濃度で抑制する。その作用は癌細胞の蛋白質リン酸化酵素(PKC)に結合し活性化するPKCアクチベーターであり、細胞周期に関わるサイクリン依存性リン酸化酵素Ccdk2活性を阻害して細胞の増殖をG_1期に停止させる。グニデェマクリン感受性のK562ヒト白血病細胞などではPKCアイソフォームのbetaIIの発現が強く見られたのでbetaIIのグニディマクリン感受性における重要性を検討した。PKCに強く作用するブライオスタチン1をK562細胞に24時間前処理すると、濃度依存的にPKCのalphaとbetaIIの発現が低下した。この発現低下に比例してグニディマクリンへの耐性が見られた。一方本質的にグニディマクリンに耐性のHLEヒト肝癌細胞にbetaII遺伝子導入を試みた結果、PKCbetaIIの発現が見られるクローンにおいてグニディマクリンによる細胞増殖の抑制が見られるようになり、betaII発現量と感受性とで相関する結果が得られた。cdk2活性阻害のメカニズムを検討した結果、K562細胞をグニディマクリン存在下で培養すると4時間後cdkに阻害因子であるp21WAFl/CIP1の発現が誘導され、そしてcdk2に強く結合していることが見い出された。さらに24時間後にはcdk2の160番目のスレオニンが脱リン酸化状態になり不活性化されていることも明らかにされた。これらの結果からグニディマクリンは癌細胞のPKC特にbetaIIに作用して細胞周期制御因子に働き、細胞増殖を抑制していると思われる。グニディマクリンは現在米国の国立癌研究所においても制癌効果が調べられ、大腸癌などに効果が見られたのでヒトの癌細胞のヌードマウスの実験系で制癌効果が調べられている。

Chinese plant extracts from Stellera chamaejasme L. can inhibit the proliferation of leukemia and solid cancer cells. The activity of protein kinase C (PKC) binds to and activates cancer cells, inhibits the activity of protein kinase C (CDK2), a cell-cycle-dependent enzyme, and stops cell proliferation during G_1 phase. To discuss the importance of PKC receptor sensitivity in the development of leukemia K562 cells PKC alpha and beta II expression decreased in K562 cells after 24 hours of pretreatment. The proportion of the occurrence of this disease is low, and the resistance to it is low. The results of betaII gene introduction test in HLEC cells with essential protein tolerance, PKCbetaII expression and inhibition of cell proliferation were obtained. As a result of this study, K562 cells were cultured in the presence of cdk2 for 4 hours and the expression of cdk2 inhibition factor p21 WAF1/CIP1 was induced. After 24 hours, the cdk2 was deactivated and the acid was removed. The results showed that PKC gene plays an important role in cell cycle regulation and cell proliferation inhibition. The National Cancer Institute of the United States of America has been working on cancer control effects, colorectal cancer, and cancer cells.

项目成果

Mitsuzi Yishida: "Antitumor activity of daphnane-type diterpene gnidimacrin isolated from Stellera chamaejasme L." International Journal of Cancer. 66. 268-273 (1996)

Mitsuzi Yishida：“从狼毒中分离出的瑞香型二萜格尼迪马克林的抗肿瘤活性。”

Weijian Feng: "Antitumor principles of Stellera Chamaejasme L." Chinese Journal of Cancer Reserch. 9(2). 89-94 (1997)

冯伟建：“狼毒的抗肿瘤原理”

Mitsuzi Yoshida: "Mechanism of antitumor action of PKC activator,gnidimacrin" International Journal of Cancer. (発表予定).

Mitsuzi Yoshida：“PKC 激活剂格尼迪马林的抗肿瘤作用机制”，《国际癌症杂志》（待出版）。

Mitsuzi Yoshida: "Mechanism of antitumor action of PKC activator,gnidimacrin" International Journal of Cancer. 77. 243-250 (1998)

Mitsuzi Yoshida：“PKC 激活剂格尼迪马林的抗肿瘤作用机制”国际癌症杂志。

吉田,光二 他: "Antitumor Activity of Daphmane-Type Diterpene Gnidimacrin Isolated from Stellera chamaejasme L." International Journal of Cancer. 66. 268-273 (1996)

Yoshida, Koji 等人：“从狼毒中分离出的瑞香型二萜 Gnidimacrin 的抗肿瘤活性”，《国际癌症杂志》66. 268-273 (1996)。