p53欠損肺癌増殖制御のWAF1誘導のためのWAF-1プロモーター領域解析の試み

尝试分析 WAF-1 启动子区域在 p53 缺陷型肺癌生长控制中对 WAF1 的诱导作用

• 批准号: 08877194
• 负责人: 戸田 省吾
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877194/
• 关键词: 癌の遺伝子調節化学療法; p53; WAF1; SP1; 酪酸; Sp1

p53の標的遺伝子であり細胞増殖を負に調節する作用を持つWAF1遺伝子を転写の段階で活性化させる薬剤、主として酪酸を主に用いて実験を進めて来た.すでにSP1エレメントがWAF1遺伝子プロモーター特異的な活性中心でありかつ酪酸に反応するエレメントであることを確認していた.さらにこの部位はTGF-βによっても活性化されることが明らかになりそのプロモーター内での重要性が示される一方で、ゲルシフトアッセイで実際にsp1.sp3がこのエレメントに結合することが示された.しかしながら、酪酸処理によるバンドパターンへの影響はみられず,少なくとも、DNA結合性の調節によって転写調節しているのではないことが確認された.ここで更に、酪酸のデアセチレラーゼ阻害能に注目し、より特異的なデアセチレラーゼ阻害剤であるトリコスタチンA(TSA)を処理し,Sp1部位を介してTSAはWAF1遺伝子を活性化した.このことよりアセチル化が、このSp1部位を介して特異的にWAF1を活性化する可能性が示された.そしてWAF1遺伝子プロモーター活性がアセチル化で増強される塩基配列がやはりsp1サイトであるwaf1プロモーターの-82と-69にあることが骨肉腫の細胞株MG63を用いた実験系で確認された.以上のことが同一の指導者の元で平行して行われた実験で得られた知見であるが、肺癌の細胞株では同様の結果を得ることができず,本年度を終了した.

Traces of p53 の mark 伝 son で あ り cells raised colonization を negative に adjust す る role を hold つ WAF1 posthumous son 伝 を planning write の Duan Jie で activeness さ せ る 薬 tonic, main と し て butyric acid を main に with い て be 験 を into め て た. す で に SP1 エ レ メ ン ト が WAF1 heritage 伝 son プ ロ モ ー タ ー specific な active center で あ り か つ butyric acid に anti 応 す る エ レ メ ン ト で あ る こ と を confirm し て い た. さ ら に こ の parts は TGF - beta に よ っ て も activeness さ れ る こ と が Ming ら か に な り そ の プ ロ モ ー タ ー within で の importance が shown さ れ る で, ゲ ル シ フ ト ア ッ セ イ で be interstate に sp1. The sp3 が こ の エ レ メ ン ト に combining す る こ と が shown さ れ た. し か し な が ら, cheese Acid 処 Richard に よ る バ ン ド パ タ ー ン へ の influence は み ら れ ず, less な く と も, DNA associativity の adjust に よ っ て planning write adjust し て い る の で は な い こ と が confirm さ れ た. こ こ で に, butyric acid の デ ア セ チ レ ラ ー ゼ resistance can harm に attention し, よ り specific な デ ア セ チ レ ラ ー ゼ resistance against tonic で あ る ト リ コ ス タ チ ン A (TS) A) を 処 し, Sp1 parts を interface し て TSA は WAF1 posthumous son 伝 を activeness し た. こ の こ と よ り ア セ チ ル が, こ の Sp1 parts を interface し て specific に WAF1 を activeness す が る possibility in さ れ た. そ し て WAF1 posthumous son 伝 プ ロ モ ー タ ー active が ア セ チ ル change で raised strong さ れ る salt base with column が や は り s P1 サ イ ト で あ る waf1 プ ロ モ ー タ ー と の - 82-69 に あ る こ と が flesh swelling の cell line MG63 を with い た be で 験 department confirmed さ れ た. Above の こ と が same の mentor の yuan で parallel し て line わ れ た be 験 で have ら れ た knowledge で あ る の が, lung cancer cell lines で は with others in the result of の を る こ と が で き ず, this year the end of を し た.