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内向き整流K^+チャネル遺伝子導入による頻拍性不整脈治療(成熟動物心筋細胞を用いた基礎研究)

通过内向整流K^+通道基因转移治疗快速心律失常（使用成年动物心肌细胞的基础研究）

基本信息

批准号：
09877011
负责人：
清末達人
金额：
$ 1.22万
依托单位：
大分医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1999
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、頻拍性不整脈における新たな治療法を開発することをめざし、心筋細胞に外来のK^+チャネル遺伝子を導入する試みを行ってきた。これまでにアフリカツメガエル卵母細胞や、哺乳動物培養細胞株(CHO細胞、COS細胞)へIRK1チャネル遺伝子を導入し、単一チャネル電流および全細胞電流を記録して、単一チャネルコンダクタンスや、平均開時間、閉時間、Ba^<2+>感受性などを調べ、IRK1チャネルの発現を確認した。本年度は、成熟心筋細胞への遺伝子導入への第一歩として、ラットの異所心移植モデル(Ono-Lindseyモデル)を作成し、電気穿孔法による遺伝子ベクター導入の試みを行った。このモデルは、ドナー心の大動脈と肺動脈をレシピエントの下大動脈と下大静脈に、それぞれ吻合させるものである。移植された心臓はレシピエントの血液循環を担う必要がないので、電気穿孔法を用いた遺伝子導入手技に伴う侵襲に十分耐えることができる。K^+チャネル遺伝子の導入に先だち、遺伝子発現のレポーター分子GFP(Green Fluorescent Protein)をコードするベクターの導入実験を行った。その結果、広範な心筋細胞が蛍光を発するようになり、電気穿孔法による遺伝子導入が可能であるという示唆が得られた。その後、実際にIRK1の遺伝子導入実験を続けているが、現段階では明らかなチャネル発現は確認されていない。今後とも引き続き、最適な手技の開発をめざして検討を進める予定である。

This study proposes a new treatment method for pulsatile pulse irregularity and a new treatment method for pulsatile pulse irregularity. , cardiomyocyte に foreign のK^ + チャネル伝子を imported するtrial みを行ってきた.これまでにアフリカツメガエルOocyte や, mammalian cultured cell line (CHO cells, COS cells) IRK1 チャネル伝子を introduction し, 単一チャネルcurrent およびWhole cell current recording して, 単一ャネルコンダクタンスや, average open time, closed time Time, Ba^<2+>sensibility などを调べ, IRK1 チャネルの発 appear をconfirmation した. This year, mature myocardial cells were introduced into the first step of transplantation of mature myocardial cells into the heart transplantation center of another place (On o-Lindsey (モデル)を成し、Electric perforation methodによる伝子ベクターIntroductionのtestみを行った.このモデルは, ドナー心の大 artery and pulmonary artery をレシピエントの inferior aorta and inferior great vein に, それぞれanastomosis させるものである. Transplantation of the heart and blood circulation of the heart is necessary and the electricity is needed The piercing method uses the technique of introducing the hand with the いた缝子, and the invasive technique is very resistant. K^+チャネル伝子の Introductionに前だち、缝子発 appearのレポーターmolecule GFP (Green Fluorescent Protein)をコードするベクターの Import実験を行った.そのRESULTS, 広法なcardioblastsが蛍光を発するようになり, electroporation method による缝子 inducted がpossible であるというshows 唆が got られた. After その后, 実记にIRK1の缝子 introduces 実験を続けているが, and the current stage では明らかなチャネル発appears and confirms されていない. From now on, we will determine the best way to perform the best skills and techniques.