甲殻類におけるマイクロダイアリシス法による血中神経ホルモンのリアルタイム測定

使用微透析实时测量甲壳类动物的血液神经激素

• 批准号: 09874180
• 负责人: 黒川 信
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09874180/
• 关键词: マイクロダイアリシス; 神経伝達物質; 神経ホルモン; 甲殻類; HPLC; セロトニン; ドーパミン; アメリカザリガニ; ホルモン; 血中濃度; グルタミン酸; GABA

甲殻類では、脳内物質のリアルタイム分析はおろか、血液中の物質変動の解析すら試みられていない。無拘束甲殻類でマイクロダイアリシス法により血液中のセロトニン、ドーパミンなどの生体アミン、グルタミン酸、GABAなどのアミノ酸の高感度HPLC分析を行った。アメリカザリガニとアメリカンロブスターを用い、氷麻酔下の個体および外的刺激による闘争ないし威嚇行動発現中の個体の各種神経ホルモン、伝達物質の血中濃度を分析し、行動との関係を解析した。アメリカザリガニでセロトニンが、アメリカンロブスターでドーパミンが、威嚇ないし闘争行動にともなって血中濃度が増大することが明らかになった。アメリカザリガニでは、セロトニンが氷麻酔時5.3±1.0、興奮時17.3±3.0、その代謝産物5-HIAAが氷麻酔時71.1±14.5、興奮時29.8±14.1であった(単位pg/10ul)。一方モノアミン、アミノ酸の血中濃度は麻酔時と興奮時で有意差が認められなかった。アメリカンロブスターでは、全個体で興奮時のドーパミン血中濃度が麻酔時のドーパミンより有意に増加した。セロトニンおよび5-HIAAは測定限界を下回った。従来の研究では、動物の行動、心理状態を考慮するどころか、in vivoでの神経伝達物質の血中濃度そのものが十分調べられていなかった。本研究では多くの神経ホルモン伝達物質について平均的な体内濃度を明らかにできたばかりでなく、行動にともなう物質変動を捉えることができた。アメリカザリガニではセロトニンレベルの上昇がセロトニン代謝産物の5-HIAAレベルの下降をともなった。一方アメリカンロブスターではドーパミンレベルの上昇が、ドーパミン代謝産物HVAの上昇をともなわなかった。今後これらの物質の放出器官や代謝経路の検討を含めて、薬理学的、組織化学的手法も取り入れて研究を進める。

Crustaceans, substances in the body of the analysis, analysis of the movement of substances in the blood test High sensitivity HPLC analysis of crustacean acids in blood by unconstrained crustacean extraction method Analysis of the relationship between the blood concentration of various nervous systems and substances in individuals during the development of threatening actions, and analysis of the relationship between actions and stimuli. The blood concentration of the patient increased during the operation. 5-HIAA was 5.3±1.0 pg/10 ul, 17.3±3.0 pg/10 ul, 71.1±14.5 pg/10 ul, 29.8±14.1 pg/10ul. The blood concentration of the acid in one side is different from that in the other side when it is excited. The blood concentration in the whole body is intentionally increased when the body is excited. 5-HIAA Recent studies have taken into account the animal's behavior and psychological state, and the blood concentration of the neurotransmitter substance in vivo has been greatly adjusted. In this study, the average body concentration of various substances in the brain and the movement of substances in the body were determined. The 5-HIAA of the product is the same as the 5-HIAA. The rise of HVA, the metabolite of the drug, was observed in the first half of the year. In the future, the study of the metabolic pathway of the release organs of these substances will be carried out by means of chemical, biological and histochemical methods.

项目成果

S.Matsumura: "Serotonergic control of the heart and pericardium in the chiton Acanthopleura japonica" Comp.Biochem.Physiol.A. in press. (1999)

S.Matsumura：“日本棘皮鳖心脏和心包的血清素控制”Comp.Biochem.Physiol.A。

K.Kuwasawa: "Cardiac reflexes and their neural pathways in lepidopterous insects." Comp.Biochem.Physiol.A. in press. (1999)

K.Kuwasawa：“鳞翅目昆虫的心脏反射及其神经通路。”

M.Kurokawa: "A reexamination of the synaptic connection between LT of the abdominal ganglion and neurons of the branchial ganglion in Aplysia californica,A.kurodai and A.juliar" Neuroscience Letters. 241. 49-52 (1998)

M.Kurokawa：“对加州海兔、A.kurodai 和 A.juliar 腹部神经节 LT 与鳃神经节神经元之间突触连接的重新检查”《神经科学快报》。

T.Yazawa: "A pharmacological and HPLC analysis of the excitatory transmitter of the cardiac ganglion in the heart of the isopod crustacean, Bathynomus doederleini" CanadianJ.Phgsiol.Pharmacol.76. 599-604 (1998)

T.Yazawa：“等足类甲壳动物 Bathynomus doederleini 心脏中心脏神经节兴奋性递质的药理学和 HPLC 分析”CanadianJ.Phgsiol.Pharmacol.76。

P.A.C.M.de Boer: "Functional role of peptidergic anterior lobe neurons in male sexual behavior of the snail Lymnaea stagnalis" Journal of Neurophysiology. 78. 2823-2833 (1997)

P.A.C.M.de Boer：“肽能前叶神经元在雄性蜗牛性行为中的功能作用”神经生理学杂志。