マリアナ海溝に生育していた脱窒細菌のエネルギー代謝と高圧環境適応機構

马里亚纳海沟反硝化细菌能量代谢与高压环境适应机制

• 批准号: 26450290
• 负责人: 為我井 秀行
• 金额: $ 3.24万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-26450290/
• 关键词: 亜硝酸塩還元酵素; ｃ型シトクロム; c型シトクロム

嫌気かつ硝酸塩存在下で培養したPseudomonas sp. MT-1菌体を破砕し、超遠心分離によって得られた可溶性画分から、イオン交換クロマトフラフィー、硫安分画。ゲル濾過などによってシトクロムcd1型亜硝酸塩還元酵素の精製を試みた。しかし本タンパク質は不安定で、精製過程で明らかに可視吸収スペクトルの変異が起こり、変性してしまった。グリセロールのような保護剤の使用、プロテアーゼ阻害剤の使用によっても状況は改善されなかった。また上記の実験の中で、可能性画分からc型シトクロムが精製された。N末端のアミノ酸配列を解析し、解析済みであるゲノム情報と照合することにより、このc型シトクロムは、亜硝酸塩還元酵素関連のタンパク質をコードするnir遺伝子クラスター中のnirM遺伝子産物（NirM）であることが明らかとなった。還元型NirMは、嫌気かつ硝酸塩存在下で培養したPseudomonas sp. MT-1菌体から得られた可溶性画分によって酵素存在下で急速に酸化された。可溶性画分には亜硝酸塩還元酵素以外にはc型シトクロムから酸素へ電子を伝達する酵素は存在しないと考えられるので、NirMが亜硝酸塩還元酵素への生理的電子供与体であることが示された。一般的にはアズリンと呼ばれる銅タンパク質も亜硝酸塩還元酵素への電子供与体となることが知られているが、本細菌のゲノム中にはアズリン相同タンパク質をコードする遺伝子は見いだされなった。したがってNirMが主要な電子供与体であることが示唆された。

It is suspected that the presence of nitric acid in the presence of Pseudomonas sp. MT-1 cell breakage, heart separation test, solubility test, cell exchange, thioampere separation, etc. This is the first time to test CD1 nitrate reductase and enzyme concentrate. This is the cause of instability and refinement in the process. You can pay attention to smoking, smoking, sex, and sex. In order to improve the situation, we should protect the use and prevent the use of the equipment. The possibility drawing is divided into two categories: C type, type c, type, type and type. The N-terminal amino acid configuration is based on the analysis, the analysis In the presence of meta-type NirM and dislike nitric acid, there are two kinds of Pseudomonas sp. MT-1 bacteria were rapidly acidified in the presence of soluble enzyme. In addition to nitrate reductase, the soluble picture is divided into two parts: the soluble picture, the nitrate reductase, the soluble picture, the soluble picture, the nitrate reductase, the soluble painting, the nitrate reductase, the soluble painting, the nitrate reductase, the nitrate reductase, the soluble painting, the nitrate reductase, the nitrate reductase, the soluble painting, the nitrate reductase, the nitrate reductase, the soluble painting, the nitrate reductase, the nitrate reductase, the soluble painting, the nitrate reductase, the nitrate reductase, the soluble painting, the nitrate reductase, the nitrate reductase, the soluble painting, the nitrate reductase, the enzyme, the enzyme and the enzyme. In general, you need to pay attention to the reduction of nitrates. the computer is used for the same purpose as that of the body, and the temperature is the same as that of the body. The main electric power supply and system of the NirM will be used to show that they are instigated.