脳神経細胞由来エクソソーム解析による統合失調症分子病態研究

利用脑神经细胞源性外泌体分析研究精神分裂症的分子发病机制

• 批准号: 22KJ1139
• 负责人: 富田 康文
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ1139/
• 关键词: エキソソーム; 神経細胞; miRNA

統合失調症の患者から採血を行い、血中からエキソソームを回収し、神経細胞由来のエキソソームを濃縮した。患者サンプルは連携先の病院の協力により、今回の研究の主眼である、統合失調症の発症原因の探究に最適な、発症後間もない患者、いわゆるFirst episode psychosisのサンプルを１６人集めることができた(本研究では採血時点で発症から５年以内の患者を使用した。)。また、First episode psychosisとは対照的な発症から１０年以上たっているような治療抵抗性の患者もサンプルに加え、統合失調症の発症時に特異的なmiRNA異常を突き止められるような解析サンプルを用意できた。これらのサンプルのコントロールサンプルとして、性別・年齢が近い疾患にかかっていないヒトのサンプルを用意した。これらも同様に、エキソソーム抽出及び、神経細胞由来のエキソソームを濃縮を行った。これらは、発症に焦点を当てつつも、脳内環境を末梢から直接探索する新しい試みである。該当のサンプルが神経細胞のマーカータンパクを含んでいることをウエスタンブロットで確認し、miRNAの抽出を行った。miRNA抽出サンプルのクオリティーチェックはバイオアナライザーで確認し、シーケンスの条件を検討することで必要なリード数が確保できることは下記人できたのちに、シーケンス解析により網羅的な解析を行った。このmiRNA発現プロファイルをコントロールサンプルのものと比較するための、解析用パイプラインを構築した。

Identity disorder in patients with の か ら blood を い, blood か ら エ キ ソ ソ ー ム を back 収 し, god 経 cell origin の エ キ ソ ソ ー ム を enrichment し た. Patients サ ン プ ル は の の hospital First link-up together に よ り, today back to の の eye で あ る, identity disorder の 発 disease causes の explore the optimal な に, 発 disease after も な い い patients, わ ゆ る First episode came Psychosis の サ ン プ ル を 16 people set め る こ と が で き た (this study で は blood collection point で 発 disease か ら を の patients within five years use し た.) . ま た, First episode came psychosis と は of seaborne な 発 disease か ら 10 years た っ て い る よ う resistance の patients treated な も サ ン プ ル に え, identity disorder の 発 disease when に specific な micrornas abnormal を tu き check め ら れ る よ う な parsing サ ン プ ル を intention で き た. こ れ ら の サ ン プ ル の コ ン ト ロ ー ル サ ン プ ル と し て, sex, years of 齢 が nearly い disorders に か か っ て い な い ヒ ト の サ ン プ ル を intention し た. こ れ ら も with others に, エ キ ソ ソ ー ム extraction and び, god 経 cell origin の エ キ ソ ソ ー ム を enrichment を line っ た. こ れ ら は, 発 に focus を when て つ つ も, 脳 environment を endings か ら directly explore す る new し い try み で あ る. Should の サ ン プ ル が god 経 cells の マ ー カ ー タ ン パ ク を containing ん で い る こ と を ウ エ ス タ ン ブ ロ ッ ト で confirm し, micrornas の spare line を っ た. Micrornas spare サ ン プ ル の ク オ リ テ ィ ー チ ェ ッ ク は バ イ オ ア ナ ラ イ ザ ー で confirm し, シ ー ケ ン ス の conditions を beg す 検 る こ と で necessary な リ ー ド number が ensure で き る こ と は remember people under で き た の ち に, シ ー ケ ン ス parsing に よ り snare な resolution を line っ た. こ の micrornas 発 now プ ロ フ ァ イ ル を コ ン ト ロ ー ル サ ン プ ル の も の と compare す る た め の, parse with パ イ プ ラ イ ン を build し た.