脳神経細胞由来エクソソーム解析による統合失調症分子病態研究

統合失調症の患者から採血を行い、血中からエキソソームを回収し、神経細胞由来のエキソソームを濃縮した。患者サンプルは連携先の病院の協力により、今回の研究の主眼である、統合失調症の発症原因の探究に最適な、発症後間もない患者、いわゆるFirst episode psychosisのサンプルを１６人集めることができた(本研究では採血時点で発症から５年以内の患者を使用した。)。また、First episode psychosisとは対照的な発症から１０年以上たっているような治療抵抗性の患者もサンプルに加え、統合失調症の発症時に特異的なmiRNA異常を突き止められるような解析サンプルを用意できた。これらのサンプルのコントロールサンプルとして、性別・年齢が近い疾患にかかっていないヒトのサンプルを用意した。これらも同様に、エキソソーム抽出及び、神経細胞由来のエキソソームを濃縮を行った。これらは、発症に焦点を当てつつも、脳内環境を末梢から直接探索する新しい試みである。該当のサンプルが神経細胞のマーカータンパクを含んでいることをウエスタンブロットで確認し、miRNAの抽出を行った。miRNA抽出サンプルのクオリティーチェックはバイオアナライザーで確認し、シーケンスの条件を検討することで必要なリード数が確保できることは下記人できたのちに、シーケンス解析により網羅的な解析を行った。このmiRNA発現プロファイルをコントロールサンプルのものと比較するための、解析用パイプラインを構築した。

統合失調症の患者から採血を行い、血中からエキソソームを回収し、神経細胞由来のエキソソームを濃縮した。患者サンプルは連携先の病院の協力により、今回の研究の主眼である、統合失調症の発症原因の探究に最適な、発症後間もない患者、いわゆるFirst episode psychosisのサンプルを１６人集めることができた(本研究では採血時点で発症から５年以内の患者を使用した。)。また、First episode psychosisとは対照的な発症から１０年以上たっているような治療抵抗性の患者もサンプルに加え、統合失調症の発症時に特異的なmiRNA異常を突き止められるような解析サンプルを用意できた。これらのサンプルのコントロールサンプルとして、性別・年齢が近い疾患にかかっていないヒトのサンプルを用意した。これらも同様に、エキソソーム抽出及び、神経細胞由来のエキソソームを濃縮を行った。これらは、発症に焦点を当てつつも、脳内環境を末梢から直接探索する新しい試みである。該当のサンプルが神経細胞のマーカータンパクを含んでいることをウエスタンブロットで確認し、miRNAの抽出を行った。miRNA抽出サンプルのクオリティーチェックはバイオアナライザーで確認し、シーケンスの条件を検討することで必要なリード数が確保できることは下記人できたのちに、シーケンス解析により網羅的な解析を行った。このmiRNA発現プロファイルをコントロールサンプルのものと比較するための、解析用パイプラインを構築した。