奇数鎖脂肪酸が示す分裂酵母生育抑制作用のメカニズム解析

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本研究の目的は奇数鎖脂肪酸による分裂酵母の生育抑制現象の分子メカニズムを明らかにすることである。特に、最も強い活性を示す炭素数15のペンタデカン酸を用いて研究を進めた。前年度までの研究結果から、ペンタデカン酸が膜脂質の組成を攪乱することで小胞体の形態異常をはじめとした各種細胞表現型が誘導され、細胞の生育抑制に至るという作用経路が推定された。本年度はこれを詳細に実証するために以下を実施した。① ペンタデカン酸で処理した際の小胞体の形態をより詳細に解析するために透過型電子顕微鏡を用いた観察を行った。その結果、蛍光顕微鏡による観察ではとらえきれなかった小胞体の異常構造を観察することに成功した。また、複数の小胞体タンパク質について局在解析を行い、どのようなタンパク質が異常構造に局在するか調べることで異常構造の特徴を把握することができた。② リピドミクスや遺伝学的解析によってペンタデカン酸がリン脂質に積極的に取り込まれることが生育抑制の原因であることを明らかにした。加えて、その積極的な取り込みに関与すると予想される脂質代謝関連分子の候補を同定した。③ ②で同定した分子について酵素試験を行い、反応の炭素鎖長依存性を調べることとした。予備的な実験として酵母細胞抽出液を用いた試験を行ったが、有意な結果が得られなかった。そこで精製した酵素を用いて試験を行うための準備として、大腸菌を宿主とした当該タンパク質の異種発現系の構築を進めた。