Assessing the utility of transgenic expression of noncatalytic mutant prostate-specific antigen (PSA/KLK3) or kallikrein 2 (hK2/KLK2) as markers for disease development and progression in different cancersusceptible mouse models

评估非催化突变型前列腺特异性抗原 (PSA/KLK3) 或激肽释放酶 2 (hK2/KLK2) 转基因表达作为不同癌症易感小鼠模型中疾病发生和进展标记物的效用

• 批准号: 77494186
• 负责人: Dr. Christian von Bodman
• 金额: --
• 依托单位: Memorial Sloan Kettering Cancer Center
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Fellowships
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2007-12-31 至 2010-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/77494186?language=en
• 关键词: Assessing; utility; transgenic; expression; noncatalytic

Mittels spezifischer Punktmutationen konnte für proPSA eine Erkennungsregion für das Enzym Furin geschaffen werden. Dieses neuartige Konstrukt führt zur konsekutiven Spaltung von proPSA zum katalytisch aktiven FUR PSA durch Furin. Als negative Kontrolle wurde ferner die katalytische Region durch spezifische Punktmutationen inaktiviert (FUR PSA IDM). Dieses neuartige Konstrukt wurde in Karzinomzelllinien transfiziert und auf Funktionalität und Stabilität in vitro untersucht. Es konnte verifiziert werden, dass katalytisch aktives FUR PSA und inaktives FUR PSA IDM in hoher Konzentration in Zellmedium sezerniert wird. Darauf aufbauend wurden 2 in vivo Modelle entwickelt, die in diesem Projekt untersucht werden: Transgene Mäuse konnten durch Klonierung des Konstruktes in einen transgenen Expressionsvektor, der die PSA Expression steuert, entwickelt werden. Durch Kreuzung dieser transgenen Mäuse mit etablierten Mauslinien, die ein Prostatakarzinom bzw. Vorstufen entwickeln, wurde ein Modell geschaffen, welches eine selektive Untersuchung der Kreuzungen möglich macht. Durch Injektion der transfizierten Tumorzellen in die Flanke von Nacktmäusen wurde ein Xenograft Projekt entwickelt. Aktuelle Serum-PSA- und Aktivitätsmessungen zeigen, dass das in vitro evaluierte Konstrukt auch in vivo zu einer Sekretion von katalytisch aktiven versus inaktiven Serinproteasen führt. Durch Monitoring der Serum PSA-Spiegel und assoziierter histopathologischer Veränderungen, sowie Messung der Tumorwachstumsraten und Metastasierungsmuster sollen die Ergebnisse dieses Projektes weiteren Aufschluss über den Einfluss der katalytischen Aktivität auf die Carcinogenese des Prostatakarzinoms geben.

Mittels specifischer Punktmutationen konnte für proPSA eine Erkennungsregion für das Enzym Furin geschaffen韦尔登。这种新的结构有助于促进PSA通过弗林催化剂活化FUR PSA。通过特异性Punktmutationen inaktiviert（FUR PSA IDM），所有阴性对照均位于催化区域。Dieses neuartige Konstrukt wurde in Karzinomzelllinien transfiziert und auf Funktionalität und Stabilität in vitro untersucht.通过韦尔登的验证，我们将在Zellmedium的更高浓度下对FUR PSA的催化活性和非催化活性进行IDM检测。在韦尔登项目中，通过对一种转基因表达载体的结构进行克隆，使转基因小鼠的PSA表达稳定，转化韦尔登。这位患有前列腺癌的变性人是一位患有前列腺癌的人。首先，我们需要一个模型，来选择一个更大的机器。在Nacktmäusen的侧腹进行移植性肿瘤注射是一个异种移植项目。Aktuelle Serum-PSA- und Aktivitätsmessungen zeigen，dass das in vitro evaluierte Konstrukt auch in vivo zu einer Sekretion von katalytisch aktiven vs. inaktiven Serinproteasen führt.血清PSA-Spiegel和相关组织病理学检查的持续监测，可以测量肿瘤的发生率和转移率，以确定是否存在对前列腺癌的致癌作用的催化活性的影响。