ABO抗原合成酵素蛋白の三次元構造抽出に基づく抗体作製戦略

基于ABO抗原合酶蛋白三维结构提取的抗体生产策略

• 批准号: 09670432
• 负责人: 滝澤 久夫
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09670432/
• 关键词: ABO bioodgroup genes; Glycosylransferase; Promoter assay; DNA polymorphism; DNA methylation; tissue-specific exptreeion; PCR; CpG island; ABO blood group; Glycosyltransferase; Antibody; Peptide-antigen; Crystallography; Transcription; peptid

我々はこれまでにABO式血液型抗原の合成に関与する糖転移酵素について抗酵素抗体を作製し、酸素蛋白の免疫学的特徴を明らかにしてきた。一方、糖転移酵素の三次元構造の解析には、アミノ酸配列、基質構造と酵素反応の活性中心等の特定、糖転移酵素蛋白のX線解析像等が重要な情報になる。これまでに様々なABO式血液型抗原の対立遺伝子の酵素蛋白のアミノ酸配列と酵素活性の関係が調べられているが、X線解析像を得るために精製された酵素蛋白質を多量に作製することは出来ていない。しかし、我々はこの研究期間内にABO式血液型遺伝子の転写制御について以下のような重要な事項を明らかに出来た。即ち、(1)ABO遺伝子の転写はcap site-CpG islandのmethylationによって抑制され、脱methylationによって促進する (2)転写開始点の上流3.2kbから4.0kbの領域には43bpを単位とする繰り返し領域があり、これが転写活性を増強する (3)この繰り返し数が1回のものは、A遺伝子と連鎖し、4回のものはBあるいはO遺伝子と連鎖している。

We are concerned about the synthesis of ABO blood antigens and the production of anti-enzyme antibodies and the immunological characteristics of acid proteins. The analysis of the three-dimensional structure of the sugar transfer enzyme, the acid alignment, the matrix structure, the activity center of the enzyme, and the X-ray analysis of the sugar transfer enzyme protein are important information. The relationship between the enzyme protein of ABO blood type antigen and the enzyme activity is regulated by X-ray analysis. During the study period, the ABO blood type gene was identified and the following important issues were identified. That is,(1) the methylation of ABO gene is inhibited and promoted by cap site-CpG island methylation,(2) the methylation activity is enhanced by 43bp in the domain upstream from the start point of ABO gene methylation,(3) the number of ABO gene methylation is 1 loop, A loop and B loop, and O loop and B loop.

项目成果

小湊慶彦: "乳幼児の血液型判定を行う際の注意点" 日本医事新報. 3874. 159-160 (1998)

小凑义彦：“确定婴儿血型时的注意事项”日本医学报 3874. 159-160 (1998)。

小湊慶彦: "遺伝子分析による血液型判定の進歩"日本法医学雑誌. 54(4). 367-375 (1997)

Yoshihiko Kominato：“利用基因分析确定血型的进展”，《日本法医学杂志》54(4) (1997)。

滝澤久夫: "ABO式血液型の研究" 日本法医学雑誌. 52(5). 265-276 (1998)

Hisao Takizawa：“ABO 血型的研究”日本法医学杂志 52(5) 265-276 (1998)。

Kominato Y.、Takizawa H.、et.al.: "Expression of human histo-blood group ABO gens is dependent upon DNA methylation of the promoter region."Journal of Biological Chemistry. 274. 37240-37250 (1999)

Kominato Y.、Takizawa H. 等人：“人类组织血型 ABO 基因的表达取决于启动子区域的 DNA 甲基化。”生物化学杂志 274. 37240-37250 (1999)

Tsukada J., Kominato Y., et al.: "Human T-cell leukemia virus type I Tax transactivates the promoter of human prointerleukin-1 β gene through association with two transcription factors, NF-IL6 and Spi-1." Blood. 90(8). 3142-3153 (1997)

Tsukada J.、Kominato Y. 等人：“人类 T 细胞白血病病毒 I 型 Tax 通过与两种转录因子 NF-IL6 和 Spi-1 关联来反式激活人类 prointerleukin-1 β 基因的启动子。” 90（8）。3142-3153（1997）。