遺伝子導入自己骨格筋細胞移植による心筋梗塞治療法の開発

基因转移自体骨骼肌细胞移植治疗心肌梗死方法的开发

• 批准号: 09557106
• 负责人: 島崎 靖久
• 金额: $ 6.27万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09557106/
• 关键词: 遺伝子治療; 細胞移植; 心筋梗塞; VEGF; 骨格筋細胞移植; metalloproteinase

本実験では遺伝子導入細胞の細胞移植が移植組織に生着し、その局所において導入遺伝子から目的蛋白質が生成され周囲組織に分泌された後、周囲組織を改変しうるか否か検討した。400gのSD系ラットを気管内挿管下に左開胸し、凍結処置により瘢痕を作成した。凍結瘢痕処置術後2週間のラットを再開胸し、凍結瘢痕化心筋組織へVEGF cDNA遺伝子導入心筋芽細胞を移植した。移植細胞は500000個/100 microlitterの細胞浮遊液を29G針を用いて注入し実施した。瘢痕病巣部の心筋芽細胞移植前後における形態変化を、HE染色、CD34及び6xHis tagged VEGFに対する免疫染色を行い評価した。HE染色で瘢痕化心筋組織内での無数の新生血管組織の形成を認め、CD34免疫染色でHE染色で認めた管腔構造が間違いなく血管組織であることを確認した。また、6xHis tagged VEGF免疫染色で移植細胞とその周囲にHis tagged VEGF陽性組織を確認し、His tagged VEGF陽性部位に一致して多数の新生血管組織を確認した。これらのことから遺伝子導入細胞からの分泌蛋白質による周囲組織改編は可能であることが確認できた。

In this paper, we introduce the gene into the cell transplantation, and the target protein is produced and secreted in the peripheral tissue. 400g SD system under the tube left chest, freeze treatment scar made 2 weeks after treatment of frozen scar, re-thoracotomy, frozen scar tissue and VEGF cDNA gene were introduced into cardiac muscle bud cells for transplantation. Transplantation of 500000 cells/100 microliter of cell suspension was carried out with 29G needles. Morphological changes, HE staining, CD34 and 6xHis tagged VEGF were evaluated before and after transplantation of cardiac muscle bud cells in scar area. HE staining confirmed the formation of numerous neovascular tissues in scarred cardiac muscle tissue, CD34 immunostaining confirmed the lumen structure and vascular tissue. 6xHis tagged VEGF immunostaining was used to identify the transplanted cells and the surrounding tissues, and most of the neovascular tissues were identified. The gene is introduced into the cell, secretes proteins, and reorganizes the tissue.