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幹細胞が持つ特性を利用した新規分化誘導方法の確立

利用干细胞特性建立新的分化诱导方法

基本信息

批准号：
22K12777
负责人：
若尾昌平
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K12777/
关键词：
Muse cell Phagocytosis Differentiation Somatic stem cell 幹細胞

项目摘要

幹細胞が持つ貪食活性を利用した分化メカニズムを解明するために以下の検討を行った。マウス由来心筋細胞、肝細胞、神経細胞からアポトーシスを誘導し、それぞれの死細胞断片をヒトMuse細胞に曝露させ、single cell RNA sequenceにより遺伝子発現解析を行った。その結果、心筋、肝臓、神経の断片を貪食したヒトMuse細胞はそれぞれの系統特異的マーカーの発現が上昇していたことから、ヒトMuse細胞の貪食による三胚葉性の分化が確認された。さらに死細胞由来の転写因子をヒト幹細胞内でトレース可能にするために、マウスGata4プロモーターの下流でHA tagとGATA4が融合タンパクを発現するマウス心筋細胞を作製した。この細胞を薬剤処理にて細胞死を起こさせ、得られた死細胞断片をヒトMuse細胞に曝露させ、抗HA tag抗体を用いてChIP sequenceを行った。シークエンスデータをもとに解析を行った結果、GATA4転写因子が結合すると報告されている結合モチーフが検出された。さらにGATA4抗体を使用して共免疫沈降反応を行ったところ、RNAポリメラーゼIIやTFII転写因子が共沈したことから、取り込まれたマウス由来転写因子がヒトMuse細胞内で働いていることが確認された。また、一般的な体性幹細胞である間葉系幹細胞や神経幹細胞もMuse細胞と同様貪食活性を持ち、これによって分化が促進されることが明らかとなった。一方で、その分化能はそれぞれ固有の能力に制限されており、間葉系幹細胞は脂肪や軟骨へ、神経幹細胞は神経やグリア細胞にのみ分化することが可能であった。

The cell keeps the activity of food and uses the differentiation to understand the activity of the cell. The cause of the disease is that the cell, the liver cell, the Muse cell, the cell, the cell The results of the experiment, heart, liver, and god fragments confirmed that the three-germ differentiation of the Muse cell cycle was confirmed by the special diagnosis of the whole system. The cause of the death of the cell is caused by the writing factor, the intracellular cell, the Gata4, the HA tag, the GATA4, the fusion, the heart, the heart. Cell death, Muse cell exposure, anti-HA tag antibody and anti-HA tag antibody were detected. This is the first time to analyze the results of a row, the GATA4 write factor, the report, the report, and so on. The GATA4 antibody was co-immunized with anti-II antibody, RNA antibody was co-immunized with II antibody, and the factor was written as co-deposition factor, Muse antibody, intracellular antibody and confirmation factor. In general, the body, the body, the cell, the cell, the Muse cell, the cell, the cell, the On the one hand, the differentiation can affect the inherent ability to limit the ability of the cell, the fat, the bone, the cell, the cell.