Analyses of neuronal circuits using genetic MRI reporters

使用基因 MRI 报告仪分析神经元回路

• 批准号: 22K12787
• 负责人: 吉田 哲
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K12787/
• 关键词: コネクトーム; MRI; トラクトグラフィー; 造影剤; AAVベクター; ニューロン

近年、コネクトーム研究とよばれる、脳の神経回路の走行をすべて決定することにより、脳機能解析の礎とする研究が世界中で活発に行われている。この研究において、MRIをもちいてニューロン内部の水分子の動きを計測し、そのデータをもとに軸索走行を擬似的に可視化するトラクトグラフィーは強力なツールであるが、実際のニューロンの形態との比較は行われておらず、その正確性は証明されぬまま現在に至っている。そこで、本研究の目的は、トラクトグラフィーとニューロンの形態の比較を可能とするために、MRIをもちいてニューロンそのものの形態を計測する方法を確立することとする。これまで、MRIをもちいてニューロンを観察できなかったのは、ニューロン特異的に取り込まれる造影剤が存在しなかったためである。本研究では、「造影剤を細胞に取り込ませる遺伝子」をニューロン特異的に発現させることにより、MRIによるニューロンの検出を可能にする。また、MRIでニューロンを可視化した脳は、その後、組織学的解析を行い、その正当性を評価する。そのために、「MRI造影剤を細胞に取り込ませる遺伝子」を発現させる細胞には、同時にGFPなどの遺伝学的マーカーを同時に発現させる。これら２つの遺伝子を発現するAAVベクターを作製し、マウスの脳にインジェクションし、その後、そのマウスに造影剤を投与した上でMRIで撮像し、そのマウスの脳を免疫組織学的に解析してどのニューロンに上記遺伝子が発現しているかを調べる。そして、MRI画像と免疫組織学的解析を行った画像を比較を行う予定である。

In recent years, research on the basis of functional analysis has been carried out in the world. The study included the measurement of water molecular dynamics in the interior of the vessel, the visualization of axial travel simulation, and the comparison of the morphology of the vessel with that of the other vessels. The purpose of this study is to establish a method for comparing the morphology of the tumor with that of MRI. This is a, MRI This study found that "imaging agent cell acquisition" and "imaging agent detection" may be related to the detection of "imaging agent" and "imaging agent". MRI visualization, histological analysis, and evaluation of legitimacy "MRI imaging system for cell acquisition" is developed simultaneously with GFP imaging system. 2. The expression of AAV protein was detected by MRI, and the expression of AAV protein was detected by immunohistochemistry. MRI imaging and immunohistochemical analysis