权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

肝星細胞の三次元培養による脂肪肝炎治療薬の新規スクリーニング系の開発

利用肝星状细胞三维培养开发新型脂肪性肝炎治疗药物筛选系统

基本信息

批准号：
22K12793
负责人：
石田誠一
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Sojo University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

非アルコール性脂肪肝炎が原因となる肝線維化を伴う肝硬変の病状の進行は予測が困難であるため、肝線維化を模倣したスクリーニング系の開発が望まれている。一方、肝星細胞は、肝線維化の責任細胞として注目されており、正常な静止星細胞(qHSC)から活性化状態（aHSC）への変化が肝線維化の原因であるものの、通常の2D培養では常にaHSCが維持されているため、現在この変化を実現できる培養系が存在しない。そこで、本研究ではqHSCの安定供給を目的とした3D培養法の開発について検討した。また、本研究では、肝星細胞と似た特徴を持つLI90細胞を様々な培養基材で培養することで、NASH治療薬開発や肝硬変を誘起する医薬品副作用の評価系に資する活性化/脱活性化の制御が可能な培養系の構築を目的としている。R4年度は下記の研究成果を得た。1)F-actinの蛍光は、monolayer培養では線維状に伸長していることが確認でき、三次元培養（スフェロイド）ではF-actinが伸長していないことが示され、スフェロイドでは活性化していないことが示唆された。2)静止期星細胞では、細胞質内にビタミンAであるレチノイドを含む脂肪滴を多く持ち、活性化状態となった肝星細胞は細胞質の脂肪滴を失う。EZSPHERE、NanoCulture Plateを用いた三次元培養（スフェロイド）ではビタミンAに由来する蛍光が観察でき、脱活性化していることが示された。3)活性化マーカーであるα-SMAの免疫染色の結果、スフェロイドのα-SMA蛍光強度は、monolayerと比較して弱くなり、LI90細胞は三次元培養により脱活性化することが示された。4)スフェロイドのαSMAの遺伝子発現は、monolayerと比べ低下することが示され、脱活性化することが示唆された。

The cause of non-recurrent steatohepatitis is the maintenance of the liver line with the symptoms of liver cirrhosis, and the liver line maintenance model is the cause of chronic steatohepatitis. One side, the liver star cell, the liver line maintenance device, the normal stationary star cell (qHSC), the active state (aHSC), the normal cell, the liver cell, the cell, the cell, In this study, qHSC diazepam was used to provide diazepam for the purpose of this study. The 3D training method was used to open a clinical training program. In this study, LI90 cell culture, liver star cell culture, NASH treatment, liver cancer, liver cirrhosis, liver cancer, liver cancer, liver cirrhosis, liver cancer, liver cancer, In the year R4, the research results have been awarded. 1) the F-actin device, the monolayer system, the device, the driver, the driver, the receiver, the operator, the driver, the driver, the 2) in the quiescent phase, there are fat droplets in the cells, fat droplets in the cells, hepatic star cells, fat droplets and fat droplets. EZSPHERE and NanoCulture Plate are used to measure the origin of the three-dimensional culture of light, inactivation and inactivation. 3) the results of α-SMA immunostaining, the light intensity of α-SMA, the intensity of monolayer, the three-dimensional culture of LI90 cells and the results of deactivation. 4) the presence of alpha SMA, the presence of monolayer, the presence of inactivation, and the indication of instigation.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

in vitro評価系に求められる肝細胞の特性とは

体外评估系统所需的肝细胞有哪些特征？

DOI：
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
0
作者：
Seiichi Ishida;Takumi Kubo;Kohei Maeda;Shinichiro Horiuchi;Yukie Kuroda;Yuji Komizu;Yuzuru Ito;Hitoshi Naraoka;Daiju Yamazaki;Taku Matsushita;石田誠一;石田誠一
通讯作者：
石田誠一

新薬開発において生体模倣システム（MPS）をヒト型in vitro薬理評価として実用するための規格化研究

新药开发中仿生系统（MPS）在人体体外药理评价中的实际应用标准化研究