低炭素社会を志向した資源循環型微細藻類物質生産システムの構築

面向低碳社会，构建资源循环型微藻材料生产体系

• 批准号: 22K12443
• 负责人: 原田 尚志
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K12443/
• 关键词: 低炭素技術; 海洋性珪藻; イソプレノイド; ゲノム編集; 代謝工学

本研究では、独自技術である珪藻類多重遺伝子改変システムを活用し、珪藻細胞のイソプレノイド基本代謝経路改変を行うことにより、内在カロテノイド、医薬品中間体およびバイオ燃料等に利用可能な有用イソプレノイドを生産モデル分子として、大量生産に向けた技術開発を目指している。これらを通じて得られる成果は、サスティナブル技術が求められる近未来社会における画期的なモノづくりのアプローチであり、海洋光合成微生物による物質生産モデル研究となり得ると期待される。初年度であるR4年度では珪藻細胞内のイソプレノイド基本代謝経路の強化を目的に、イソプレノイド前駆体生産経路であるメバロン酸経路をターゲットとし、先行研究から律速因子と推定される3酵素（HMG-CoA合成酵素・HMG-CoA還元酵素・メバロン酸キナーゼ）、ならびにモデル化合物であるα-farnesene合成酵素の遺伝子カセットを含む基本代謝経路強化ベクターを4種構築した。各遺伝子間は、ブタテスコウイルス1由来自己切断ペプチド（P2Aペプチド）配列で連結することでバイシストロン性発現ベクターとして構築し、ベクターの小型化を図った。構築したベクターは、いずれも接合伝達用大腸菌においても安定に保持された。さらに、これら構築したベクターの一部を大腸菌による接合伝達を介して珪藻細胞に導入して選抜し、約50株の形質転換株を取得した。得られた形質転換株については、ベクターが導入されていることが確認できた。

This study aims to develop technologies for the production of molecules that may be useful in the field of bioengineering, including the use of independent technologies, the transformation of basic metabolic pathways, the transformation of intrinsic bioengineering, pharmaceutical intermediates, and fuels. The results of this research are expected to be achieved in the near future. In the first year and the fourth year, with the aim of strengthening the basic metabolic pathway in algae cells, the proton-producing pathway of the proton-producing pathway of the proton-(HMG-CoA Synthetase, HMG-CoA Reductase, α-farnesene Synthetase, α-farnesene Synthe Each sub-sub-sub, sub-sub-sub The construction of the joint was carried out by E. coli and the stability was maintained. A portion of the E. coli strain was constructed and approximately 50 mutant strains were obtained. We have to change the nature of the plant, and we have to confirm it.