ウズラの精巣機能制御におけるＡＭＨの役割とその分子機構の解明

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昨年度までの研究により、成体の精巣において、AMHの発現制御系が機能していること、短日条件の精巣ではAMHとその受容体が顕著に発現していることが明らかとなった。そこで、今年度の研究では、受容体の下流のシグナル伝達系に着目した研究を行った。AMHはTGFβ superfamilyに属する因子であり、Smadという細胞内情報伝達因子をシグナル伝達に用いている。そこで、実際にシグナル伝達が起こりうるのかを調べるため、Smadの発現解析を行った。その結果、5種類のSmadのうち、AMHが活性化するSmad1, Smad5の発現量が短日条件の精巣で顕著に増加していた。 また、AMH以外のTGFβ superfamily の因子の発現解析も行ったところ、AMHとSmadを共有するTGFβ familyのリガンド・受容体の発現量が短日条件の精巣で増加していた。次にSmadが活性化(リン酸化)されているのかを調べるため、リン酸化Smadを認識する抗体を用いてWestern Blottingを行った。その結果、短日条件の精巣ではリン酸化Smad1/5が増加していた。AMHとその受容体の発現に加えて、Smad1/5の発現および活性型が短日条件の精巣で増加しており、AMHは短日条件の精巣において機能していることが強く示唆された。また、AMHと同じSmadを活性化するTGFβ familyのリガンド・受容体の発現も同様の結果であったことから、AMHはTGFβとSmadを介して協調的にはたらいている可能性も考えられる。前年度の研究と合わせることで、①成体の精巣において、性分化因子の中でAMHの発現制御系が機能していること、②AMHはTGFβ superfamilyの一員として成体の精巣で機能していることが強く示唆された。