采用健康的肠神经嵴干细胞/前体细胞替代、修复缺失或无功能神经元可能是治愈肠神经系统疾病有效策略之一。尽管移植后肠神经嵴干细胞/前体细胞能够定植、生存、增殖、迁移和分化，并具有一定程度修复的肠神经系统能力，但也存在定植能力差、生存时间短、增殖有限、分化能力低，缺乏有效的细胞标记，修复后的肠神经系统尚不具有完整调控功能的神经网络等问题。本研究在前期工作（HSCR 患儿p75NTR 免疫阳性神经元切除病变肠管中的时空分布、HSCR患儿肠粘膜层ENS干细胞定位、人胚胎肠神经嵴前体细胞的体外培养及诱导分化、大鼠ENCCs 移植AG 模型鼠8 周内观察）的基础上，通过体外培养新生SD大鼠ENCCs，连续观察并分析在体外培养环境下ENCCs增殖、迁移、凋亡及分化的潜能；利用各种不同时间和浓度的BAC处理实验SD大鼠结肠段，通过大体观察结合组织学结果制作动物模型；评估慢病毒介导eGFP FRG感染对ENCCs增殖、迁移、凋亡以及分化的影响；采用多点注射的方法将上述eGFP阳性 ENCCs注射至动物模型结肠段，并辅以5-HT4受体激动剂MOS，观察移植后内、外源性ENCCs生存、增殖、迁移、分化情况，分析外源性ENCCs移植、5-HT4受体激动剂MOS对残存内源性ENCCs生存、增殖、迁移、分化的影响以及改善肠功能情况，为实现自体移植修复ENS提供新的研究思路和实验依据。主要研究成果如下：①子代ENCCs发育潜能即增殖、迁移潜能逐渐下降，凋亡逐渐上升而神经元方向的分化潜能逐渐下降；② 0.1%-30-min BAC处理SD大鼠在第7天到第84天间可用于制作少神经节细胞症动物模型；③慢病毒介导eGFP FRG可高效地标记ENCCs；④外源性ENCCs移植和协同5-HT4 受体激动剂刺激内源性ENCCs修复ENS功能。总之，本课题的研究为实现简便有效实用的肠神经重建修复策略和方法，研究外源性干细胞移植-内源性肠神经干细胞激活机制的研究提供理论和实验证据。