视交叉上核表达的PK2和PKR2基因在金黄地鼠近日节律功能中的研究

Prokinecticn 2（PK2）是新发现的神经多肽,与其受体PKR2分布于下丘脑的视交叉上核及其投射位点，对神经系统的近日节律功能可能十分重要，然而其作用机制还未被深入研究。本项目将以金黄地鼠为动物模型，通过对基因表达的脑内定点RNA干扰，研究视交叉上核表达的PK2和PKR2基因在近日节律功能中的作用及神经生物学基础：.在金黄地鼠中克隆PK2和PKR2基因，对其在视交叉上核的表达进行脑片的原位杂交定位和定量分析；制备针对PK2的抗体，用免疫组化和原位杂交方法视交叉上核内PK2与VIP和AVP等多肽的分布关系及PK2蛋白表达的昼夜变化；制备并筛选针对PK2和PKR2的有效RNA干扰构建体，将其包装入腺相关病毒（AAV）载体；在视交叉上核区定点注射实现RNAi，通过ClockLab和VitalView系统记录动物的行为与生理活动，分析视交叉上核表达的PK2和PKR2在近日节律中的作用。