内质网应激对肝纤维化恢复期肝星状细胞凋亡的调控机制研究

实验室前期研究发现在肝纤维化逆转恢复期枯否细胞可通过分泌TRAIL经由线粒体途径诱导活化的HSC凋亡，从而逆转肝纤维化。其确切的作用机制不明。内质网应激是除死亡受体及线粒体通路之外的第三条凋亡通路。其在肝纤维化病程中如何变化，是否参与活化HSC的凋亡，与TRAIL诱导的凋亡之间是否存在联系？为此，本课题主要研究内质网应激在肝纤维化逆转恢复期对HSC凋亡的调控，探讨其在HSC内可能的信号传导通路，进一步研究在肝纤维化逆转恢复期TRAIL与ERS诱导的HSC凋亡的相互关系，ERS对枯否细胞分泌TRAIL的调控作用及机制，为进一步明确肝纤维化的发病机制提供依据。.本研究主要分为四个部分：.1、肝纤维化自愈模型的建立及分期，动态观察肝纤维化各期HSC内质网应激相关蛋白Casepase-12，CHOP，GRP78的表达变化；.2、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TNF-related apoptosis inducing-ligand, TRAIL）通过ERS对活化的HSC凋亡的调控及部分机制的研究，结果发现ERS标志性蛋白CHOP可诱导TRAIL受体DR5的表达明显上调，CHOP和JNK可能是调节 DR5表达的潜在因子。同时还发现TRAIL可能通过诱导PDGF活化的HSC中内质网应激相关蛋白CHOP，GRP78，Caspase-12的表达，从而促进HSC的凋亡；.3、肝纤维化逆转恢复期内质网应激相关蛋白诱导HSC凋亡作用研究及信号传导通路研究，结果发现ERS参与活化HSC凋亡的调控，其机制可能与其释放细胞内钙离子，导致细胞内钙离子升高，从而诱导Calpain/Caspase和JNK/p38 MAPK激活有关；.4、ERS诱导RAW 264.7巨噬细胞株中TRAIL的表达及机制研究，结果发现JNK/AP-1信号通路参与内质网应激诱导的RAW 264.7巨噬细胞株中TRAIL表达的调控，SOCS3通过JNK/AP-1信号通路负调控ERS诱导的RAW 264.7巨噬细胞株TRAIL表达。