基于LC3Ⅱ/p62介导的自噬与NF-kB促炎信号通路交互调控探讨电针对神经病理性疼痛大鼠的镇痛机制研究

背景：损伤及炎症是NPP发生发展的主要因素，针刺治疗NPP的神经细胞分子靶点的研究具有十分重大的意义。.方法：将100只SD大鼠利用随机表法随机分为5组（每组20只）：正常组、假手术组、模型组、胆经电针组、膀胱经电针组。按取标本时间点再各分为术后3天组、7天组、14天组、21天组，共4个亚组，每亚组5只大鼠，并按各时间点进行指标测定。建立坐骨神经结扎模型（CCI）大鼠，采用电针分别干预足少阳胆经腧穴“环跳”“阳陵泉”“悬钟”和足太阳膀胱经腧穴“承扶”“委中”“承山”的方法，在不同时间节点检测大鼠机械痛域（PMWT）和热痛域（PWTL）。检测五组大鼠炎性因子IL-1、IL-6、TNF-α及自噬因子LC3Ⅱ含量表达情况，观察电针对CCI大鼠自噬调节作用。.结果：术前，各组大鼠PMWT和PWTL差异无统计学意义；术后第3天，模型组、胆经电针组、膀胱经电针组PMWT和PWTL均低于正常组和假手术组，说明造模成功；术后第14天，与模型组相比，电针组PMWT和PWTL均升高（P＜0.05)；术后第21天，电针组PMWT和PWTL持续升高，且胆经电针组增幅较膀胱经电针组大（P＜0.05)。PCR法测定IL-1的表达，电针造模后第14天，胆经电针组降低IL-1的表达，与模型组、膀胱经电针组IL-1的表达差异具有显著性（p＜0.05)；WesternBlot检测CCI大鼠DRG内LC3Ⅱ表达水平，结果发现LC3Ⅱ与正常组的无明显差异，表明造模后背根神经节可能不发生自噬。WesternBlot检测CCI大鼠坐骨神经内LC3Ⅱ表达水平结果发现，术后第14天，与模型组比较，胆经电针组大鼠坐骨神经内LC3Ⅱ的表达降低（p＜0.05)；术后第21天，胆经电针组大鼠坐骨神经内LC3Ⅱ表达量明显降低，具有统计学意义（p＜0.01）；而膀胱经电针组降低效果不明显(p＞0.05)。由此可见，电针干预足少阳胆经可明显地降低CCI模型大鼠LC3Ⅱ的表达水平。ELISA检测IL-6、TNF-α的表达水平，电针干预第14天后，胆经电针组IL-6、TNF-α的表达水平均低于模型组和膀胱经电针组（p＜0.05)。.结论：胆经电针干预可以减少坐骨神经中的自噬关键因子LC3Ⅱ的表达量，抑制自噬，并下调炎性因子IL-1、IL-6、TNF-α的表达水平，提示电针治疗NPP 可通过调节自噬，减少炎症因子释放而参与镇痛过程。