碱性氨基酸修饰的可控分离介质用于血清中唾液酸糖肽的精准富集与鉴定
批准号:
21804130
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
27.0 万元
负责人:
董雪芳
依托单位:
学科分类:
B0401.分离与分析
结题年份:
2021
批准年份:
2018
项目状态:
已结题
项目参与者:
俞冬萍、曹翠岩
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中文摘要
血液中蛋白的唾液酸糖基化状态与人体的癌症疾病密切相关,开展唾液酸糖基化研究将有利于疾病的早期诊断。然而常规糖基化研究是先将所有类型的糖肽进行富集,再进行糖基化分析。唾液酸化糖肽作为糖肽中具有特殊结构的一类糖肽,同时具有亲水性、带电性。若采用常规糖肽富集方法,会导致低含量唾液酸糖肽产生选择性差、回收率低等问题,影响对唾液酸糖基化的进一步研究。因此需要发展具有高选择性的精准富集材料与方法。本项目以唾液酸糖肽为研究对象,结合其结构特性,发展以碱性氨基酸修饰的唾液酸糖肽精准富集材料,建立有特色的精准富集方法,解决低丰度唾液酸糖肽的富集难题。最后将方法应用于正常与肝癌病人血清酶解液中唾液酸糖肽的精准富集与鉴定中,实现全面、精准的唾液酸糖基化分析,为癌症发生发展等生命过程的研究提供方法基础和技术支持。
英文摘要
The sialylation of proteins plays significant roles in carcinoma processes and the sialylation research will help make the early diagnosis. All kinds of the glycopeptides are enriched by the routine research methods, while the sialic-acid glycopeptides with low abundance and amount cannot be enriched due to the matrix interference. So further research of sialylation cannot be achieved.Two characters of hydrophilicity and electriferous property of the sialic-acid glycopeptides give us the enlightenment. Based on the characters, basic amino acid modified accurate enrichment medium can be prepared. The specific accurate enrichment method can be built. At last, this method will be applied to the sialylation research in serum and the research foundation of carcinoma mechanism can be supported.
血液中蛋白的唾液酸糖基化状态与癌症密切相关,开展唾液酸糖基化研究将有利于疾病的早期诊断。唾液酸化糖肽作为糖肽中具有特殊结构的一类糖肽,同时具有亲水性、带电性。若采用常规糖肽富集方法,会导致低含量唾液酸糖肽产生选择性差、回收率低等问题,影响对唾液酸糖基化的进一步研究。因此需要发展具有高选择性的精准富集材料与方法。本项目针对上述难点问题,开展了如下3个方面研究:1. 在碱性氨基酸材料设计与制备方面,项目执行人首先发展了基于硅烷化与环氧开环结合的材料制备方法,通过调控优化制备工艺中的各项参数,成功制备了基于组氨酸修饰的高选择性富集材料;其次,项目执行人基于可逆加成-断裂链转移聚合(RAFT)反应的特点,利用带有精氨酸结构的单体制备了仿生聚合物富集材料;2. 在唾液酸糖肽富集方法学方面,项目执行人在基于已发展的组氨酸修饰富集材料和仿生聚合物材料,展开了系列唾液酸糖肽富集方法的深入研究与优化,实现了唾液酸糖肽的高选择性富集,无论是在模拟复杂样品体系中还是实际样品中都表现出极高的选择性、可重复性、高回收率等;3. 在实际样品人血清唾液酸糖基化研究方面,项目执行人结合前期开发的材料与方法,成功完成正常人与肝癌病人血清中唾液酸糖基化的鉴定分析,实现了糖基化位点与糖链结构的同时定量,为肝癌病人的临床诊断提供有力支持。此外,针对人血清中抗体IgG的糖基化定量问题,发展了新型定量方法,可以实现人血清中抗体IgG的相对定量。值得一提的是,2020年新冠疫情肆虐,项目执行人利用已发展的带有精氨酸结构的仿生聚合物富集材料,针对新冠病毒刺突蛋白的唾液酸化及糖基化进行了分析与鉴定,为深入解析新冠病毒刺突蛋白的结构组成提供了丰富的信息。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Calibration for quantitative Fc-glycosylation analysis of therapeutic IgG1-type monoclonal antibodies by using glycopeptide standards
使用糖肽标准品对治疗性 IgG1 型单克隆抗体进行定量 Fc 糖基化分析的校准
DOI:10.1016/j.aca.2021.338306
发表时间:2021
期刊:Analytica Chimica Acta
影响因子:6.2
作者:Cao Cuiyan;Yu Long;Zhang Xiuli;Dong Xuefang;Yuan Jingli;Liang Xinmiao
通讯作者:Liang Xinmiao
Highly Efficient Analysis of Glycoprotein Sialylation in Human Serum by Simultaneous Quantification of Glycosites and Site-Specific Glycoforms
通过同时定量糖位点和位点特异性糖型来高效分析人血清中的糖蛋白唾液酸化
DOI:10.1021/acs.jproteome.9b00332
发表时间:2019-09-01
期刊:JOURNAL OF PROTEOME RESEARCH
影响因子:4.4
作者:Qin, Hongqiang;Dong, Xuefang;Ye, Mingliang
通讯作者:Ye, Mingliang
Deciphering the O-Glycosylation of HKU1 Spike Protein With the Dual-Functional Hydrophilic Interaction Chromatography Materials.
使用双功能亲水相互作用色谱材料破译 HKU1 刺突蛋白的 O-糖基化。
DOI:10.3389/fchem.2021.707235
发表时间:2021
期刊:Frontiers in chemistry
影响因子:5.5
作者:Cui Y;Dong X;Zhang X;Chen C;Fu D;Li X;Liang X
通讯作者:Liang X
TiO(2) Simultaneous Enrichment, On-Line Deglycosylation, and Sequential Analysis of Glyco- and Phosphopeptides.
TiO(2) 糖肽和磷酸肽的同步富集、在线去糖基化和顺序分析。
DOI:10.3389/fchem.2021.703176
发表时间:2021
期刊:Frontiers in chemistry
影响因子:5.5
作者:Chen C;Zhang X;Dong X;Zhou H;Li X;Liang X
通讯作者:Liang X
Comprehensive O-Glycosylation Analysis of the SARS-CoV-2 Spike Protein with Biomimetic Trp-Arg Materials
使用仿生色氨酸-精氨酸材料对 SARS-CoV-2 刺突蛋白进行全面的 O-糖基化分析。
DOI:10.1021/acs.analchem.0c04634
发表时间:2021-07-20
期刊:ANALYTICAL CHEMISTRY
影响因子:7.4
作者:Dong, Xuefang;Chen, Cheng;Liang, Xinmiao
通讯作者:Liang, Xinmiao
基于仿生凝集素材料的β-冠状病毒刺突蛋白O糖基化研究
- 批准号:--
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:54万元
- 批准年份:2022
- 负责人:董雪芳
- 依托单位:
国内基金
海外基金















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