DNA聚合酶iota 新型剪接变异体在肿瘤高突变表型发生中的作用探讨

近年来高错配倾向DNA聚合酶的逐一发现及主要参与高突变产生的DNA跨损伤复制过程的新认识为肿瘤遗传不稳定性的研究提供了新的重要线索。本课题选择其中体外复制错配率最高的DNA聚合酶 iota (polι)，为深入探讨其体内生物学意义及转录调控机制，从mRNA选择性剪接入手，展开Polι及Polι剪接变异体（Polι-V）分子在DNA 损伤后跨损伤复制过程中的作用以及与肿瘤遗传不稳定性的关系研究。在通过昆虫表达系统及体外跨损伤复制模型充分鉴定Polι-V酶学特性基础上，探测其在正常与肿瘤组织、细胞中的表达以证实与肿瘤的相关性；选择激光共聚焦技术，鉴定其参与体内跨损伤复制过程；通过建立稳定高表达哺乳细胞模型与体内supF报告基因突变检测系统,探明其在体内损伤耐受中的能力以及在自发突变或诱发突变形成中的作用。该研究对于揭示肿瘤遗传不稳定性的产生机制及肿瘤诊断具有重要的理论与现实意义。