人DNA聚合酶η（hPolη或Polη）是着色性干皮病变种（xeroderma pigmentosum variant，XPV）基因的编码产物，属于Y族DNA聚合酶。它在各种遗传毒性因子所诱发的跨损伤合成过程中起着重要作用。Polη缺失会在XPV病人中导致恶性皮肤癌的早期生成，并可增强紫外线诱发的致癌作用。研究表明，Polη与机体对氢醌（hydroquinone，HQ）所致毒性之间存在联系。为了进一步认识Polη在HQ所致DNA损伤耐受过程中的作用，我们采用RNA干扰技术来沉默Polη在L-02细胞内的表达，并确定Polη缺陷细胞对HQ毒性效应的易感性。在本研究中，我们在肝细胞用HQ处理之后，采用倒置显微镜观察肝细胞形态；采用MTT实验检测细胞存活率；采用彗星实验检测DNA链断裂；采用HPLC-EC法检测8-OHdG；采用激光扫描共聚焦荧光显微镜观察γ-H2AX焦点；采用流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布状况；采用定量PCR检测DNA损伤检查点基因的mRNA表达水平；采用western blot检测DNA损伤检查点蛋白的蛋白质表达水平及其磷酸化程度。此外，我们还采用免疫共沉淀和剥离免疫印迹技术检测了Polη泛素化状况，并采用激光扫描共聚焦荧光显微镜观察了L-02细胞内Polη与泛素之间的相互作用。结果发现，Polη表达的抑制导致了HQ作用下肝细胞增生的减少，并使肝细胞对HQ所致细胞毒性的敏感性增强；Polη的缺陷明显增加了HQ所致肝细胞DNA损伤的程度；Polη表达的抑制在肝细胞内增强了HQ所诱发的细胞凋亡效应和细胞周期的S期阻滞。本研究也发现，HQ作用条件下，Polη的缺陷明显增加了Chk1、p53和RPA2在肝细胞内的表达水平；HQ可在肝细胞内引起DNA损伤检查点蛋白Chk1、Chk2、p53、H2AX和RPA2的强烈磷酸化，并且其磷酸化效应在Polη缺陷的肝细胞内得到了明显增强。此外，本研究还发现，Polη与泛素在肝细胞内共定位并相互作用，而该种作用在HQ处理下能够以剂量依赖性方式得到加强并受蛋白酶体抑制剂MG132的影响。总之，Polη可能通过调节细胞增生、凋亡、细胞周期、DNA修复、DNA损伤检查点蛋白的活化和泛素化而在肝细胞对HQ所引起的DNA损伤耐受中发挥着重要的作用。本研究可为建立机体对HQ所致DNA损伤的防御体系提供科学的理论依据。