慢性乙肝免疫耐受的原因之一是患者体内树突状细胞（DC）抗原提呈功能缺陷。本研究首先从慢性乙肝病人血清和肝组织中利用保守序列扩增、测序和中和抗体检测等方法筛选新的AAV类型,发现2例与其他已经报道的病毒同源性相差20%以上，提示有可能是新型AAV。 第二，以新型AAV的包装蛋白cap构建辅助质粒，与现有常用血清型AAV－1，2，5，6，8载体比较，制备携带报告基因及HBV抗原包装成新型AAV重组病毒。将重组AAV/HBV分别感染从慢性乙肝病人和健康人外周血中分离出的单核细胞。感染后的单核细胞在GM-CSF、IL-4和TNF-α作用下继续培养7天获得成熟的DC。用RT-PCR及流式细胞仪细胞内染色分别检测HBV基因的RNA和蛋白在DC的表达，其中AAV-2/HBV和AAV-8/HBV病毒对DC的感染效率最好，在80-90%左右。第三，将同一个体的DC与T细胞混合培养制备成效应细胞CTL，观察CTL对HBV感染的靶细胞的细胞毒杀伤作用。实验结果表明AAV-2和AAV-8携带的/HBV-S, C 或X 刺激DC后均可以产生明显的抗原特异性的细胞毒杀伤，CTL杀伤率均在30-50%左右，明显高于对照组。同时特异性的CTL杀伤反应可以被MHC-I型抗体所阻滞，提示此种特异性的CTL反应主要通过MHC-I型抗原介导。 最后，检测了不同AAV类型在整合和影响树突状细胞表面分子等方面的机理。发现了AAV可以与宿主染色体整合，提高CTL干扰素γ表达。. 在本研究中我们应用AAV为载体的重组病毒，将其分别带有HBV的S、 C或X基因，分别转化刺激人外周血培养的DC，观察感染转化效率和抗原的表达，以及由DC提呈抗原引起的特异性的CTL杀伤作用，并优化条件初步用于慢性乙肝病人体外培养的细胞，为进一步临床应用于慢性乙肝病人提供研究基础。