自噬信号在骨髓瘤耐药中的作用及其药物干预

采用透射电镜与蛋白印迹，对比分析骨髓瘤耐药/敏感株自噬体/自噬溶酶体数，自噬相关蛋白（Atg5，Atg7，Atg8/LC3， Atg6/Beclin1）表达量以及自噬调控分子mTOR的激酶活性，以明确骨髓瘤耐药株的自噬特征；采用慢病毒介导的RNA干涉（靶向Atg5、Atg6/Beclin1）、3-甲基腺嘌呤（3-MA）及羟基氯喹（HCQ），研究自噬抑制对骨髓瘤耐药株凋亡易感性（化疗药物触发）的影响，以期建立自噬与骨髓瘤耐药间的因果关系；最后，采用免疫磁珠法，分离、纯化初治和难治（各10例）骨髓瘤患者的骨髓原代肿瘤细胞，对比分析其自噬特性，并观察3-MA和 HCQ对其凋亡易感性或药敏性的影响。项目主要意义：①探讨自噬信号在骨髓瘤耐药中的作用，有可能揭示一种介导骨髓瘤耐药的新机制；②探讨自噬抑制剂对骨髓瘤耐药性的影响，有可能为将来针对自噬信号通路设计新的骨髓瘤治疗策略提供实验依据。