从家蝇表达文库中筛选抗病基因及其功能确证

本课题组拟结合mRNA差异显示技术从家蝇幼虫表达文库中筛选抗病基因并进行其抗病功能的确证。课题组目前的研究结果表明，蘸取适量临床分离的猪链球菌、猪肺炎支原体及其猪蓝耳病毒以针刺法诱导三日龄家蝇幼虫后，分别以诱导前、后的cDNA为模板，采用mRNA差异显示技术扩增获得了诱导后产生的多条差异条带，正在进行差异基因与其表达文库的杂交验证，以其通过克隆表达文库中的差异基因，获得完整的家蝇幼虫抗病基因序列；通过上述抗病基因在动物细胞中表达产物的体外抗病活性测定，检测其在动物体外的功能；通过上述抗病基因的真核表达产物在动物体内的抗病活性测定，确证该基因在动物体内的抗病功能，以筛选得到至少3个强效抗病基因，并通过抗病基因的核苷酸及氨基酸序列分析，为家蝇抗菌肽的分子改良提供借鉴，为采用基因工程手段制备猪蓝耳病、猪气喘病及猪链球菌病的有效治疗药物奠定基础。