酵母液泡ATP酶（V-ATPase）的分子电镜学研究

V-ATPase是一种广泛存在的ATP依赖型质子泵。它参与一系列重要的细胞生理作用，与糖尿病、癌症、艾滋病等多种疾病的产生密切相关。V-ATPase的旋转催化机制可被用来设计高效纳米分子器件。作为一种独特的活性调控方式，V-ATPase能够可逆性地解离和再结合。V-ATPase的外围支柱在维持其整体结构稳定和活性调控方面起到重要作用，其外围支柱的结构、数量和在V-ATPase中的分布等问题尚未解决。申请人在前期工作中解析了酵母V1的三维电镜结构，通过抗体标记和分子电镜确定了亚基C在酵母V-ATPase中的空间位置。本项目将综合运用分子生物学、生物化学和分子电镜学等方法，解析完整酵母V-ATPase的三维电镜结构，确定酵母V-ATPase的外围支柱亚基E、G的数量和空间位置。研究结果将从结构生物学的角度，为阐明V-ATPase的活性调控机制、相关疾病的药物设计和纳米分子器件设计提供理论基础。