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脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠Notch-mTOR-能量代谢轴变化及四神丸干预机制研究

批准号:
82060838
项目类别:
地区科学基金项目
资助金额:
34.0 万元
负责人:
程绍民
依托单位:
学科分类:
中医诊断学
结题年份:
2024
批准年份:
2020
项目状态:
已结题
项目参与者:
程绍民

项目摘要

结项摘要

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中文摘要
脾肾阳虚证是慢性溃疡性结肠炎(UC)的主要证型,其临床辨证存在一定主观性,结合客观指标能提高辨证的准确性。作为当前的研究热点,Notch-mTOR信号与细胞能量代谢相互关联,参与了脾肾阳虚型UC发病过程,提示脾肾阳虚型UC可能存在Notch-mTOR-能量代谢信号轴的变化。而四神丸是有效治疗UC的基础方,具有良好的临床和实验基础,然其作用机制不明。我们拟采用经典的脾肾阳虚型UC动物模型,经四神丸治疗后,分别采用PCRarray分析、流式细胞术等试验方法,评价其治疗前后能量代谢水平和相关基因表达的变化,探索脾肾阳虚型UC大鼠Notch-mTor-能量代谢轴变化特征,为脾肾阳虚型UC的辨证提供客观化证据;并从Notch-mTOR-能量轴角度以方测证,明确四神丸能否通过调控Notch-mTOR信号介导能量代谢变化达到治疗目的。这对于脾肾阳虚型UC的诊断及治疗有重要临床价值和科学意义。
英文摘要
Spleen-Kidney-Yang deficiency syndrome is the main syndromes in UC chronicperiod. Its syndrome differentiation has certain subjectivity. Combining with objective indicators can improve the accuracy of syndromedifferentiation.Signaling pathway of Notch bonded with mTOR can regulate cell energy metabolism, is closely related with Spleen-Kidney-Yang Deficiency Ulcerative Colitis(SKYDUC) disease . It is hinded that there are Changes of Notch-mTOR-Energy Metabolic Axis.We intend to adopt the classical UC animal model of SKYDUC,and evaluate curative effect, the level of energy metabolism, gene expression of SSW treated SKYDUC.Exploring the characteristics of Notch-mTor-energy metabolism axis in SKYDUC rats can provides objective evidence for differentiation of syndrome of SKYDUC and explore the possible mehanism of SSW treated replased SKYDUC,and determine whether SSW can achieve therapeutic purpose by regulating Notch-mTOR signal to mediate energy metabolism changes. It has important clinical value and scientific significance for the diagnosis and treatment of SKYDUC.
经文献整理发现,调控 Notch-mTOR-能量代谢信号轴变化是探索中医药治疗脾肾阳虚型 UC 的可能突破口和有效策略。.研究目的:从Notch-mTOR-能量代谢信号轴变化探索脾肾阳虚型溃疡性结肠炎的特征性变化及四神丸的作用机制。.研究方法:采用DSS诱导小鼠脾肾阳虚型溃疡性结肠炎,经四神丸给药治疗14天后,采用病理形态学分析等评价其疗效,采用酶联免疫吸附试验检测结肠组织中炎性细胞因子表达,生化检测分析结肠上皮组织能量代谢水平、蛋白印迹法、PCRarray法检测结肠上皮线粒体能量代谢通路相关基因 mRNA 的表达及Notch-mTOR 信号的启动、活化及下游蛋白以及Notch-mTOR 信号调控能量代谢主要蛋白和基因表达。.研究结果:经四神丸治疗后,脾肾阳虚型结肠炎小鼠结肠重量减轻、结肠长度恢复、肠重指数及结肠单位长度重量及病理损伤评分显著下降,同时病理损伤明显缓解。四神丸可有效降低结肠组织中细胞外ATP、AMP,升高ADP和Ado水平,恢复ADP/ATP及AMP/ATP之间平衡,可有效调节线粒体能量代谢途径如 ATP1B2 mRNA, ATP1B3 mRNA等的表达,并抑制其结肠组织Notch3, mTOR, Jagged1, DLL1, DLL4, Hes1, CDX2等蛋白表达, 促进KLF4表达,还可以抑制其结肠组织Glut1, Glut2,Glut3, Glut4及HIF-1a等蛋白表达, 促进AMPK-a和PGC-a表达。.研究结论:四神丸有效治疗脾肾阳虚型小鼠治疗溃疡性结肠炎,有可能是通过抑制Notch-mTOR信号途径抑制其结肠上皮组织能量代谢水平而实现的。
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