课题基金 / 基金详情

基于UPLC-QTOF技术和体内过程的合欢皮木脂素类物质抗焦虑活性物质基础研究

批准号:
81274069
项目类别:
面上项目
资助金额:
65.0 万元
负责人:
干国平
依托单位:
学科分类:
中药药效物质
结题年份:
2016
批准年份:
2012
项目状态:
已结题
项目参与者:
杨德森、叶小敏、刘毅、彭小芝、范晓磊、雷咪、李金涛、方志兴、付琴琴

项目摘要

结项摘要

项目成果

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中文摘要
合欢皮是传统的具有镇静安神功效的中药,现有研究发现合欢皮的粗提取物具有抗焦虑活性,但对合欢皮抗焦虑活性成分缺乏系统的研究,尤其是其抗焦虑的活性成分及作用机制和作用靶点,目前尚未明了。本申请项目旨在解决这些关键问题。本课题组发现合欢皮木脂素类成分具有很强的抗焦虑活性。据此,本项目拟采用药理学、分子生物学、药物分析学、中药化学、药物化学等多学科交叉方法,应用UPLC-QTOF技术和构建国内外认可药理筛选模型,将体内过程与体外活性研究有机结合,系统地分离鉴定合欢皮抗焦虑的活性成分,从药物对焦虑症应激反应的神经-内分泌-免疫网络调控角度,在整体水平、细胞水平及分子水平探讨活性成分的作用机制,明确其作用靶点。以筛选的活性成分作为先导化合物进行结构修饰,研究构效关系,为抗焦虑药物的研发提供目标化合物,为合欢皮临床疗效提供科学依据,为开发抗焦虑的创新药物奠定基础。
英文摘要
Cortex Albiziae is one of the traditional Chinese herbs with tranquilizing effect.Many studies have recently shown that crude extract of Cortex Albiziae has significant antianxiety effect. But at present the material base of the antianxiety effect of Cortex Albiziae has not yet been confirmed, especially its active ingredients and the mechanism of action and the targets of drug action have not been elucidated. This application project aims to solve these key problems.Our research group has found that Cortex Albiziae lignanoids material has a significant antianxiety effect. Accordingly, Our research group plans to achieve an objective to optimize the best active ingredients and modify the chemical constitution of active ingredients through a method based on the UPLC-QTOF technology coupled with the study of the process in vivo and of setting up the pharmacological screening model proposed by experts at home and aboard. This is an application of interdisciplinary research techniques including pharmacology, pharmaceutical analysis science, molecular biology and chemistry of Traditional Chinese Medicine.It provides the organic combination of the study of the process in vivo and active material research in vitro.Meanwhile, the possible mechanism of antianxiety effect of active ingredients of the antianxiety effect of Cortex Albiziae lignanoids material is to be probed from the animal, cell and molecule levels from the aspect of nervous-endocrine-immune network.We believe that this study will contribute to offer target compounds in antianxiety drug development and find the acting targets, which will put forward to achieve integral study on therapeutic basis matter and action mechanism of Cortex Albiziae, and then to provide the scientific basis for the antianxiety clinical efficacy of Cortex Albiziae, lay the foundation for the development of new antianxiety drug.
合欢皮具有镇静安神功效,研究发现其粗提物具有抗焦虑活性。我们运用现代科学技术,对合欢皮的抗焦虑活性物质基础及其作用机制进行研究。从合欢皮中筛选出毒性低、抗焦虑有效部位S-75,优选其提取纯化工艺,建立其质量控制方法;采用UPLC-Q/TOF-MS技术对S-75的血清药物化学进行研究;从S-75中分离得到6个化合物;成功合成4-O-丁香树脂酚等14个化合物;通过观察S-75对急性应激后高架十字迷宫模型小鼠脑组织中神经递质含量和5-HT1A受体、GABAA受体及相关受体信号通路的影响,发现S-75能升高γ-GABA及降低5-HT含量,促进5-HT1AR、GABAAR的mRNA和蛋白表达,促进5-HT1AR信号通路中的关键环节BDNF、CREB、PKA、TRKB的蛋白表达和cAMP水平升高。表明S-75抗焦虑作用机制可能与5-HT1AR信号通路有关。通过观察S-75对0.1mmol•L-1皮质酮诱导的PC12细胞的作用及加入相应受体阻断剂后对PC12细胞的影响,发现S-75促进PC12细胞增殖,促进PC12细胞5-HT1AR、GABAAR的mRNA和蛋白表达,使PC12细胞BDNF、CREB、PKA、TRKB的蛋白表达和cAMP水平升高。当S-75协同应用5-HT1AR受体阻断剂WAY-100635时,PC12细胞5-HT1AR、BDNF、CREB、PKA、TRKB的蛋白表达相应减少和cAMP水平相应下降。因此,进一步证实S-75抗焦虑症的作用机制与5-HT1AR信号通路密切相关。对7个木脂素类成分进行活性筛选,结果,7种化合物均有促进PC12细胞增殖作用,其中不同浓度的化合物(-)-丁香树脂酚-4-O-β-D-葡萄糖苷(SRG)促进PC12细胞增殖作用均显著且量效关系明显,是合欢皮抗焦虑主要活性成分。且SRG抑制PC12细胞LDH渗漏,减少细胞凋亡,对线粒体膜有保护作用,可抑制细胞内[Ca2+]释放,促进PC12细胞线粒体凋亡信号通路中的关键环节BDNF、CREB、Bcl-2、Caspase 3的蛋白表达,抑制Bax和细胞色素C的蛋白表达。结论: SRG能抑制0.1mmol•L-1皮质酮诱导的PC12细胞凋亡,其作用机制亦与抑制PC12细胞线粒体凋亡通路有关。本项目取得的研究成果,诠释了合欢皮抗焦虑药效物质基础,为其临床疗效提供科学依据,为开发抗焦虑创新药物奠定了基础。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI: --
发表时间: 2016
期刊: 湖北中医药大学学报
影响因子: --
作者: [王红, 罗来春, 干国平, 彭小芝]
通讯作者: 彭小芝
DOI: --
发表时间: 2014
期刊: 时珍国医国药
影响因子: --
作者: [范小龙, 杨德森, 杨敏, 干国平]
通讯作者: 干国平
DOI: --
发表时间: 2015
期刊: 中华中医药杂志
影响因子: --
作者: [方志兴, 田微, 干国平]
通讯作者: 干国平
DOI: --
发表时间: 2015
期刊: 湖北中医药大学学报
影响因子: --
作者: [田微, 叶小敏, 杨德森, 干国平]
通讯作者: 干国平
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