甲基化-microRNA-c-kit通路调控AML发生与复发的新机制

携带t(8;21)的急性髓细胞白血病（AML）患者预后较好，但伴有原癌基因c-kit突变/异常表达时，其复发和死亡率明显增加，是临床治疗中的难点。microRNA可通过调控多种基因表达参与造血系统发育和恶变。我们在携带t(8;21)和c-kit突变/过表达的AML细胞中，首次鉴定出两个通过抑制c-kit表达发挥抑癌作用的microRNAs— miR-193a、miR-193b。我们发现miR-193a位于CpG岛，并在AML细胞系和原代白血病细胞中，而非正常细胞中，因DNA高甲基化而表达沉默。更为重要的是，在9个AML细胞系和27例AML患者的原代白血病细胞中，miR-193a的表达水平与c-kit基因的表达水平呈负相关。通过去甲基化药物5-azacytidine处理或细胞转染恢复miR-193a表达可抑制c-kit的mRNA和蛋白表达，同时抑制白血病细胞增殖、诱导其分化。此外，miR-193a抑制剂能够逆转5-azacytidine诱导的c-kit表达水平下调以及其抗增殖、促凋亡的作用。上述研究结果提示，miR-193a被甲基化沉默在白血病的发生中发挥重要作用，设法恢复miR-193a的表达是c-kit阳性AML的潜在治疗手段。本课题从表观遗传学的研究角度，以携带c-kit突变/异常表达的t(8;21) AML患者为研究对象，分析了上述microRNA异常高甲基化和低表达对c-kit通路的调控作用及其在AML发生和复发中的意义，解释病理状态下c-kit活化失控的原因，并尝试通过干预上述microRNA甲基化和表达来逆转c-kit的异常活化，为深入认识AML的发病机制、预测其复发、开发新的治疗靶点提供了实验基础和理论依据。