骨髓移植后小鼠肝原位动态病理观察以验证肝流域假设

成体肝内源和外源性肝干细胞在肝再生中的作用是肝干细胞领域亟待阐明的核心命题之一。本组最近发现小核分裂相等新病理现象并提出了相关的肝流域假设。拟将雄性的C57绿色荧光蛋白转基因小鼠(GFPM)的骨髓,移植到经致死剂量照射的普通雌鼠和将雄性普通鼠骨髓移植到经照射雌性GFPM,定期多次切肝或不切肝或CCl4肝损伤(其中一组雌鼠在骨髓移植前已被诱发肝硬化),结合对照组动态观察：肝内组织和细胞的形态改变,荧光显微镜下绿色荧光的细胞分布；原位PCR技术检测肝内细胞GFP和Sry基因；免疫组化双标或荧光双标原位检测几种细胞分化标志CD34,Thy-1,CXCR4,CK7,CK19,AFP和Alb的表达变化，阐明：1.骨髓源和肝内源肝干细胞及肝细胞在肝再生中的作用；2.几组实验条件下肝组织结构或状态不同,这对肝内源和外源性肝干细胞参与肝再生有何影响。以验证肝流域假设并为自身肝干细胞的应用研究增添基础。