健脾通里中药对胃切除大鼠肠黏膜上皮紧密连接的影响及其机制
结题报告
批准号:
81573987
项目类别:
面上项目
资助金额:
57.0 万元
负责人:
于庆生
依托单位:
学科分类:
H3109.中医外科学
结题年份:
2019
批准年份:
2015
项目状态:
已结题
项目参与者:
张珺、王伟、周富海、何素敏、刘举达、黄龙、袁以洋、经文善、刘名扬
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中文摘要
手术等应激可引起肠屏障功能障碍,导致细菌易位、全身炎症反应综合征和多器官功能障碍综合征,严重影响疾病转归和预后。肠上皮细胞间紧密连接是构成肠黏膜机械屏障的核心,在肠屏障中发挥至关重要的作用,其物质基础主要由细胞膜蛋白occludin、claudin和细胞质蛋白ZO-1构成。我们以往研究证实,健脾通里中药具有保护胃切除后肠屏障功能,但是否通过影响紧密连接及其调节其分子表达而实现,尚不清楚。本项目拟在我们前期研究基础上,通过建立胃切除手术大鼠模型,健脾通里中药小肠内滴注,进而:(1)电镜下观察紧密连接的形态结构;(2)免疫荧光法检测紧密连接分子occludin、claudin、ZO-1共定位;(3)免疫共沉淀法检测结合;(4)荧光定量PCR 检测其转录;Western blot检测其蛋白表达。旨在多途径观察中药对术后紧密连接的影响及其分子机制,为中药保护肠屏障功能及其危重病的防治奠定基础。
英文摘要
Serious stress, including surgical stress etc, can cause dysfunction of intestinal mucosa barrier, thus lead to bacterial translocation, endotoxemia, systemic inflammatory response syndrome(SIRS) and multiple organdysfunction syndrome(MODS),which seriously influence the outcome and prognosis of disease. Tight junctions in intestinal mucosa epithelial cells, the core part of gut mucosal mechanical barrier, plays a vital role in gut mucosal barrier. The material basis and molecular structure are almost clear, which mainly consist of cytomembrane protein including occludin、claudin and cytoplasm protein ZO-1..Our previous clinical and animal experiments all confirmed that herbs of tonifying spleen and catharsishas have the effect of protecting the gut mucosal barrier. However,it’s unknow whether the mechanism is to realize by influencing tight junctions and regulating the expression of.molecules.This project is planned on the basis of our preliminary studies through the estabilishment of gastrectomy surgical trauma model in rats,dripping herbs of tonifying spleen and catharsis into small intestine to intervention study, aims: (1)To observe the morphological structure of tight junctions via electron microscopy. (2)To detect the co-location of occludin, claudin and ZO-1 proteins by immunofluorescence. (3)To detect the combination that between occludin, claudin and ZO-1 proteins by immunoprecipitation.(4)To detect the gene transcription circumstance of occluding, claudin and ZO-1 proteins by fluorogenetic quantitative RT-PCR and the expression of proteins after transcription by Western blot.This project aims at investigating the influence of herbs on tight junctions and the mechanism of molecules after surgical stress in different ways and levels, laying a foundation for protection of gut mucosal barrier, prevention and treatment of related critical diseases with traditional Chinese medicine.
手术等应激可引起肠屏障功能障碍,导致细菌易位、全身炎症反应综合征和多器官功能障碍综合征,严重影响疾病转归和预后。肠上皮细胞间紧密连接是构成肠黏膜机械屏障的核心,在肠屏障中发挥至关重要的作用,其物质基础主要由细胞膜蛋白occludin、claudin和细胞质蛋白ZO-1构成。本项目拟在我们前期研究基础上,通过建立胃切除手术大鼠模型,健脾通里中药小肠内滴注,进而:(1)电镜下观察紧密连接的形态结构;(2)免疫荧光法检测紧密连接分子occludin、claudin、ZO-1共定位;(3)免疫共沉淀法检测结合;(4)荧光定量PCR检测其转录;Western blot检测其蛋白表达。结果表明,健脾通里中药芪黄煎剂对胃切除手术创伤引起的肠黏膜上皮细胞间紧密连接破坏具有保护作用。其作用机制通过①促进Occludin、Claudin-1和ZO-1分子mRNA和蛋白表达;②促进受损的紧密连接连续性和完整性得到较好的恢复;③加强Occludin、Claudin-1和ZO-1分子在近细胞处分布强度,加强彼此之间互相结合来实现的。.本研究揭示①芪黄煎剂能够促进紧密连接蛋白Claudin-1、Occludin、ZO-1的表达,进而增强紧密连接的作用,维持肠黏膜的完整性和通透性,对胃切除术后肠屏障功能障碍患者意义重大;②中药芪黄煎剂对肠黏膜紧密连接蛋白影响的研究通过文献检索未见报道。我们的研究填补了这一领域的学术空白,并为临床开展肠黏膜屏障功能的保护和危重病的治疗奠定了理论基础;③本研究首次通过HPLC分析芪黄煎剂主要有效成分,为芪黄煎剂的深入研究奠定了基础。旨在多途径观察中药对术后紧密连接的影响及其分子机制,为中药保护肠屏障功能及其危重病的防治奠定基础。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:10.13457/j.cnki.jncm.2017.11.042
发表时间:2017
期刊:新中医
影响因子:--
作者:冯辉;于庆生;范文华;沈毅;张琦;刘举达;周富海
通讯作者:周富海
DOI:--
发表时间:2017
期刊:安徽中医药大学学报
影响因子:--
作者:余树山;于庆生;彭辉;张琦;刘举达;周富海;范文华
通讯作者:范文华
DOI:10.13194/j.issn.1673-842x.2018.11.014
发表时间:2018
期刊:辽宁中医药大学学报
影响因子:--
作者:冯辉;于庆生;沈毅;张琦;刘举达;周富海
通讯作者:周富海
Qihuang decoction promotes the recovery of intestinal immune barrier dysfunction after gastrectomy in rats
芪黄汤促进大鼠胃切除术后肠道免疫屏障功能障碍的恢复
DOI:--
发表时间:2018
期刊:American Journal of Translational Research
影响因子:2.2
作者:Peng Hui;Shen Yi;Zhang Qi;Liu Juda;Wang Zhen;Huang Long;Zhou Fuhai;Yu Jian;Liu Mingyang;Yuan Yiyang;Yu Shushan;Yu Qingsheng
通讯作者:Yu Qingsheng
DOI:--
发表时间:2017
期刊:中国当代医药
影响因子:--
作者:张万宗;于庆生;沈毅;张琦;刘举达
通讯作者:刘举达
芪黄煎剂促进胃切除术后胃肠动力恢复及其基于巨噬细胞M1极化和BMP-Smad通路调节肠神经细胞机制
  • 批准号:
    82374208
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    49万元
  • 批准年份:
    2023
  • 负责人:
    于庆生
  • 依托单位:
芪黄煎剂抑制大鼠胃切除细菌移位及其基于lncRNA MALAT1海绵miR-146a调控TLR4/NF-κB信号通路诱导巨噬细胞M1型极化机制
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55万元
  • 批准年份:
    2021
  • 负责人:
    于庆生
  • 依托单位:
芪黄煎剂对大鼠胃切除后肠黏膜免疫屏障的影响
  • 批准号:
    30973855
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    22.5万元
  • 批准年份:
    2009
  • 负责人:
    于庆生
  • 依托单位:
国内基金
海外基金